[发明专利]同时展示EV71病毒和CVA16病毒中和抗原表位的重组腺病毒在审
| 申请号： | 201910466052.0 | 申请日： | 2019-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN110283795A | 公开（公告）日： | 2019-09-27 |
| 发明（设计）人： | 王长兵;田新贵;许甜甜;朱冰 | 申请（专利权）人： | 广州市妇女儿童医疗中心 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/41;C12N15/63 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 林玉芳;刘婉 |
| 地址： | 510180 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组腺病毒 中和抗原表位 病毒中和 抗原表位 六邻体 病毒 手足口病 中和抗体 基因 制备 诱导 展示 预防 | ||
1.一种同时展示EV71病毒和CVA16病毒中和抗原表位的重组腺病毒，其特征在于：所述重组腺病毒的六邻体HVR1区插入有EV71病毒SP70中和抗原表位基因，所述重组腺病毒的六邻体HVR2区插入有CVA16病毒PEP55中和抗原表位基因。
2.根据权利要求项1所述的重组腺病毒，其特征在于，所述重组腺病毒是3型腺病毒。
3.根据权利要求项1或2所述的重组腺病毒，其特征在于，所述重组腺病毒是人3型腺病毒。
4.根据权利要求项1或2所述的重组腺病毒，其特征在于，所述重组腺病毒是E3区缺陷的3型腺病毒。
5.制备权利要求1至4任一项所述的重组腺病毒的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：扩增腺病毒的突变六邻体基因，其中所述腺病毒的突变六邻体基因在其HVR1区插入有EV71病毒SP70中和抗原表位基因，在HVR2区插入有CVA16病毒PEP55中和抗原表位基因，将所述腺病毒的突变六邻体基因通过酶切连接至穿梭质粒；
步骤2：将上述连接有所述腺病毒的突变六邻体基因的穿梭质粒与腺病毒骨架质粒酶切回收相应片段后，在大肠杆菌中进行同源重组，获得六邻体突变的重组腺病毒质粒；
步骤3：用所述六邻体突变的重组腺病毒质粒转染293细胞，培养，得到所述重组腺病毒。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述腺病毒骨架质粒是pBRAd△E3GFP。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述穿梭质粒是pBRLHR。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述大肠杆菌是BJ5183。
9.一种用于治疗/预防由EV71病毒和CVA16病毒引起的手足口病的疫苗组合物，其特征在于包括根据权利要求项1至4任一项所述的重组腺病毒作为活性成分。
10.根据权利要求项1至4任一项所述的重组腺病毒用于制备治疗/预防由EV71病毒和CVA16病毒引起的手足口病的药物的用途。
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