[发明专利]RORγt活性抑制化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种RORγt活性抑制化合物及其制备方法和应用。该RORγt活性抑制化合物具有如下结构式(A)：本发明经过研究发现，该具有结构式(A)的化合物具有良好的RORγt活性抑制作用。具体地，通过荧光素酶活性报告系统和Th17细胞分化实验证明该化合物可以抑制Th7细胞分化的关键转录因子RORγt的转录作用，能够抑制RORγt的靶基因IL17A和IL17F分子的转录表达，用流式细胞仪检测蛋白水平的IL17A在细胞内的表达也得到明显抑制，证明该化合物分子具有明显的Th17细胞活性抑制功能。因而，该化合物可以用于制作相应的活性抑制制剂，为自身免疫疾病的治疗药物研发提供先导结构。

技术领域

本发明涉及药物合成技术领域，尤其是涉及一种RORγt活性抑制化合物及其制备方法和应用。

背景技术

目前，自身免疫疾病大约影响了全世界5％的人群，包括牛皮癣、多发性硬发症、风湿性关节炎、哮喘和炎症性肠道病在内的大约70多种人类疾病都与自身免疫失调有关(Goodnow et al.,2005)。目前自身免疫疾病的治疗主要依赖于一些非选择性的免疫抑制剂，其疗效有限且副作用大，因而在临床中还没有非常特效的治疗自身免疫疾病的药物。因此研发新型的高疗效低副作用的自免疫药物成为一种急切的临床需求。

研究表明，T细胞亚群Th17细胞和人类自身免疫疾病和相关动物模型的发生相关(Linden 2006；Kikly et al.,2006)。在风湿性关节炎、牛皮癣、哮喘、炎症性肠炎等自身免疫疾病中，Th17细胞的特征细胞因子IL17表达上调，而抑制IL17表达和Th17细胞形成可以减轻自身免疫疾病的发生或临床严重程度(Bowman et al.,2006；Kikly et al.,2006)。现有研究表明，Th17细胞的分化形成受到转录因子RORγt的控制，而RORγt基因敲除的小鼠中Th17细胞的分化能力下降，数量减少，同时诱导发生的小鼠EAE自身免疫疾病概率和临床打分指标均有显著的降低(Ivanov et al.,2006)。这意味着RORγt的功能抑制剂可以作为开发Th17介导的自身免疫疾病治疗药物的定向靶标。

RORγt是类固醇类核受体家族成员，蛋白分子中包括一个保守的DNA结合域和由12个螺旋构成的配体结合域，而配体结合域是结合配体、核定位和二聚体形成的重要区域。类固醇类受体共激活分子SRCs能够通过结合配体结构域的AF2区域来解聚转录抑制复合物，招募转录激活分子，启动相关基因转录(Glass and Rosenfeld,2000)。目前RORγt的天然配体还没有找到，但最近两个研究找到了人工合成分子地高辛及其衍生物(Huh et al.,20011；Fujita-Sato et al.,2011)和SR1001(Solt et al.,2011)能够特异性的结合到RORγt的配体结构域，抑制RORγt的功能并降低Th17细胞的分化能力，减弱小鼠自身免疫疾病EAE的临床症状。然而地高辛及其衍生物具有很强的毒性(Paula et al.,2005)，而SR1001分子尽管在体外能够有效抑制Th17细胞分化，但在体内实验中即使在高浓度给药下(40mg/kg)，也只能略微减轻EAE的临床症状。此外，SR1001能够同其他的RORs作用，选择性较差(Solt et al.,2011)。这些研究一方面表明抑制RORγt的功能来治疗自身免疫疾病是一个可行的方案，但目前还没有找到一个理想的靶标药物。因此寻找高效低毒且有较强特异性的RORγt功能抑制剂将是开发Th17介导的自身免疫疾病药物的一个重要方向。

发明内容

基于此，有必要提供一种RORγt活性抑制化合物及其制备方法和应用。

一种RORγt活性抑制化合物，具有如下结构式(A)：

其中，R₁与R₂分别独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、C1至C4的直链或带支链的烷基、中的一种，R₄选自

R₃选自甲基、