[发明专利]基于18F-FDG检测红细胞吞噬及体内分布的方法

权利要求书

1.基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，包括如下步骤：

（1）制作红细胞悬液；

（2）调整18F-FDG标记液渗透压；

（3）18F-FDG标记红细胞；

（4）提前将巨噬细胞种至24孔板中，每孔中加500ul完全1640培基；

（5）取10ul步骤（3）中标记过的红细胞至90ul完全1640培基中，混匀得到红细胞悬液，并取10ul上述红细胞悬液加至24孔板的一个孔中，混匀；

（6）将步骤（5）中一个孔中孵育后的培基溶液收集至1.5ml EP管1中，再向每孔中加入500ul红细胞裂解液；

（7）将24孔板对应孔中的巨噬细胞吹打下来并和该孔中剩余的溶液一起收集至1.5mlEP管2中；

（8）将上述步骤中的溶液离心，将上清收集至EP管1中，用PBS重悬EP管2中的巨噬细胞沉淀；

（9）检测EP管1与EP管2的放射性，并计算吞噬比例，吞噬比例 = EP管2放射性/（EP管1放射性+ EP管2放射性）×100%。

2.根据权利要求1所述的基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，其特征在于，所述步骤（1）包括如下步骤：

（ⅰ）收集全血标本，将全血标本以离心，得到压积红细胞与血浆；

（ⅱ）取100ul上述步骤的压积红细胞，加1mlPBS洗3遍后离心；

（ⅲ）取100ul上述步骤中的压积红细胞，加入25ul PBS，得到红细胞悬液，耗糖。

3.根据权利要求2所述的基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，其特征在于，所述步骤（ⅰ）、（ⅱ）中离心条件均为4℃条件下离心5min，离心力为500g。

4.根据权利要求1所述的基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，其特征在于，所述步骤（2）为每100ul¹⁸F-FDG中加11ul 10x PBS。

5.根据权利要求1所述的基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，其特征在于，所述步骤（3）包括将制作的红细胞悬液与调整渗透压的18F-FDG 37℃孵育30min，并用1ml PBS将上述溶液洗3遍，离心。

6.基于18F-FDG检测红细胞体内分布的方法，包括如下步骤：

（1）制作红细胞悬液；

（2）调整18F-FDG标记液渗透压；

（3）18F-FDG标记红细胞；

（4）取100ul上述步骤中的压积红细胞向其中加入500ulPBS，混匀后取300ul上述溶液检测放射性并记录；

（5）将上述步骤中检测过放射性的300ul溶液尾静脉注射至小鼠体内，记录开始注射时间和注射结束时间；

（6）迅速将小鼠麻醉，并迅速固定至CT架上；

（7）按仪器提示依次输入开始注射时间、结束注射时间、注射液体体积、注射液体放射活度、PET扫描时间建立扫描程序并开始扫描；

（8）PET扫描结束后进行CT扫描；

（9）扫描结束后根据所需时间点输入相应时间间隔重建数据，得到各个时间点的累积数据。

7.根据权利要求6所述的基于18F-FDG检测红细胞体内分布的方法，所述步骤（1）包括如下步骤：

（ⅰ）收集小鼠全血，在4℃下以500g离心力离心5min，得到压积红细胞与血浆；

（ⅱ）取100ul上述步骤中的压积红细胞，用PBS洗3遍；

（ⅲ）取100ul上述步骤中压积红细胞，加入25ul PBS，得到红细胞悬液，耗糖。

8.根据权利要求6所述的基于18F-FDG检测红细胞体内分布的方法，其特征在于，所述步骤（2）为每100ul18F-FDG中加11ul 10x PBS。

9.根据权利要求6所述的基于18F-FDG检测红细胞体内分布的方法，其特征在于，所述步骤（3）将制作的红细胞悬液与调整渗透压的18F-FDG 37℃孵育30min，并用1ml PBS将上述溶液洗3遍，离心。