[发明专利]一种脐带间充质干细胞冻存液及其用途

说明书

本发明公开了一种脐带间充质干细胞冻存液及其用途，冻存液包括人血清白蛋白溶液、二甲基亚砜溶液、营养因子和药学上可接受的载体，所述营养因子为血管内皮细胞生长因子VEGF、转化生长因子TGF、白介素6IL‑6、纤维芽细胞生长因子bFGF、肝细胞生长因子HGF中的一种或多种，所述脐带间充质干细胞冻存液在脐带间充质干细胞冻存中的应用。通过上述方式，本发明采用一类特定的冻存液，可以冻存脐带间充质干细胞并使冻存后的脐带间充质干细胞保持活性和分化干性，具有良好的冻存效果。

技术领域

本发明涉及细胞冻存技术领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞冻存液及其用途。

背景技术

细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。

细胞冻存是利用冻存技术将细胞置于-196℃的液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于临床应用。适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时加入冻存液，可使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。采用“慢冻快融”的方法能较好地保证细胞存活。

目前传统的细胞冻存液含有基础培养基、二甲基亚砜、胎牛血清等，但胎牛血清成分复杂，含有大量的异体抗原，在后续的复苏培养环节很难清洗干净，回输到人体造成抗原抗体副反应，因此目前倾向于采用无血清的替代物冻存细胞。但是，对于间充质干细胞而言，即使采用无血清替代物的冻存液冻存后也会造成间充质干细胞的“低温眩晕效应(Cryo-stun effect)”，导致间充质干细胞失能效应，失去间充质干细胞的“干性(stemness)”，使间充质干细胞的临床应用受到极大的限制。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种脐带间充质干细胞冻存液及其用途，所述脐带间充质干细胞冻存液施用方便、组分优化，能够保持冻存后脐带间充质干细胞“干性stemness”。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种脐带间充质干细胞冻存液，包括人血清白蛋白溶液、二甲基亚砜溶液、营养因子和药学上可接受的载体，所述营养因子为血管内皮细胞生长因子VEGF、转化生长因子TGF、白介素6IL-6、纤维芽细胞生长因子bFGF、肝细胞生长因子HGF中的一种或多种。

在本发明一个较佳实施例中，所述人血清白蛋白溶液为质量分数为5-15％的人血清白蛋白溶液；所述二甲基亚砜溶液为质量分数为5-10％的二甲基亚砜溶液；所述血管内皮细胞生长因子的浓度为2-3ng/mL，所述纤维芽细胞生长因子的浓度为2-6ng/mL，所述白介素6的浓度为2-3ng/mL，所述肝细胞生长因子的浓度为15-20ng/mL，所述转化生长因子的浓度为10-15ng/mL；所述人血清白蛋白溶液和所述二甲基亚砜溶液的质量比为1-2:1；所述药学上可接受的载体为复方电解质注射液；所述脐带间充质干细胞冻存液为单元剂型，所述单元剂型的体积为≤4mL。

在本发明一个较佳实施例中，所述人血清白蛋白溶液为质量分数为8-12％的人血清白蛋白溶液；所述二甲基亚砜溶液为质量分数为7-9％的二甲基亚砜溶液；所述人血清白蛋白溶液和所述二甲基亚砜溶液的质量比为1-1.5:1；所述单元剂型的体积为≤2mL。

提供一种脐带间充质干细胞冻存液的用途，所述脐带间充质干细胞冻存液在脐带间充质干细胞冻存中的应用。

在本发明一个较佳实施例中，每10⁵-10⁸/mL所述脐带间充质干细胞施用每个单元的所述脐带间充质干细胞冻存液。