[发明专利]一种快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法

说明书

本发明公开了一种快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，包括以下步骤：S1、菌悬液的制备：取多种微生物菌种分别制备成菌悬液，每种菌悬液中微生物的浓度为10⁵～10⁶cfu/ml；S2、试验平板的制作：在已灭菌的平板中分别加入所述步骤S1制得的菌悬液，然后在每块所述平板上打孔，去除孔内的培养基并向孔内加入防腐剂，将加入防腐剂后的平板在培养箱中培养；S3、抑菌圈的测量：测量培养结束后的各平板中的抑菌圈直径，根据抑菌圈直径的大小定性判定植物防腐剂KM的防腐效力；若所述抑菌圈直径在10mm以上，判定所述植物防腐剂KM的抑菌效果较好且抑菌圈的直径越大，抑菌效果越好。

技术领域

本发明涉及防腐技术领域，具体涉及一种快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法。

背景技术

由于化妆品的制备材料中通常包含多种有机物，这些有机物可为微生物提供碳源和氮源，同时，化妆品通常还含有水分，极易滋生细菌等微生物。因此，化妆品在生产、储藏和使用过程中极易受到不同程度的微生物污染。根据《化妆品安全技术规范》(2015版)的规定，可依据造成污染的微生物来源，将化妆品中发生的污染分为一次污染和二次污染。一次污染是指化妆品在生产过程中导致的污染，可通过对生产设备、人员操作进行控制；二次污染指化妆品使用过程中造成的污染，这一污染较难控制。同时，该规范中还对化妆品中微生物的限度给出了明确规定；目前，化妆品行业内评价防腐体系的防腐效力是采用美国化妆品盥洗用品和香水协会(Cosmetic，Toiletry and Fragrance Association，CTFA)的评价方法，该方法的评价结果有效可靠，但需要历经28天的防腐挑战试验，加上前期的微生物培养及菌液浓度确定和防腐测试总计需要58天左右。然而，对于前期确定防腐剂是否有防腐效力来说，若使用该评价方法，则会使得时间成本太高，不利于推进整个实验进程。因此，如何快速且有效地定性确定防腐剂是否对化妆品中限定微生物有杀菌、抑菌效果是化妆品领域中亟待解决的问题。

植物防腐剂KM(中文名：茵陈蒿花提取物/萝卜根发酵滤液/牡丹根提取物，INCI：ARTEMISIA CAPILLARIS FLOWER and EXTRACT，RADISH ROOT FERMENT FILTRATE andPAEONIA SUFFRUTICOSA ROOT EXTRACT)，是一种常用的天然防腐剂。由于来源广泛且对人体伤害小，在各种化妆品的制备中具有广泛的应用前景。在应用于化妆品前需对其防腐效力及最佳浓度进行测定，现有技术中，针对植物防腐剂KM的前期定性防腐效力通常采用纸片法进行测定，然而传统纸片法未能完全反映防腐剂的防腐效力，仍需进一步改善。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种评价结果有效可靠且操作简便的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，包括以下步骤：

S1、菌悬液的制备：取多种微生物菌种分别制备成菌悬液，每种菌悬液中微生物的浓度为10⁵～10⁶cfu/ml，所述微生物包括大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌、黑曲霉菌和肺炎克雷伯氏菌；

S2、试验平板的制作：在已灭菌的平板中分别加入所述步骤S1制得的菌悬液，然后在每块所述平板上打孔，去除孔内的培养基并向孔内加入防腐剂，将加入防腐剂后的平板在培养箱中培养，其中，含细菌类微生物的平板在37℃下培养24h，含有真菌类微生物的平板在28℃下培养3天，霉菌类微生物的平板在28℃下培养5～7天，防腐剂的添加量为0.00125～0.02mg/ml；

S3、抑菌圈的测量：测量培养结束后的各平板中的抑菌圈直径，根据抑菌圈直径的大小定性判定植物防腐剂KM的防腐效力；若所述抑菌圈直径小于10mm，则判定所述植物防腐剂KM的抑菌效果较差；若所述抑菌圈直径在10mm以上，判定所述植物防腐剂KM的抑菌效果较好且抑菌圈的直径越大，抑菌效果越好。