[发明专利]一种快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法

权利要求书

1.一种快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、菌悬液的制备：取多种微生物菌种分别制备成菌悬液，每种菌悬液中微生物的浓度为10⁵～10⁶cfu/ml，所述微生物包括大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌、黑曲霉菌和肺炎克雷伯氏菌；

S2、试验平板的制作：在已灭菌的平板中分别加入所述步骤S1制得的菌悬液，然后在每块所述平板上打孔，去除孔内的培养基并向孔内加入防腐剂，将加入防腐剂后的平板在培养箱中培养，其中，含细菌类微生物的平板在37℃下培养24h，含有真菌类微生物的平板在28℃下培养3天，霉菌类微生物的平板在28℃下培养5～7天，防腐剂的添加量为0.00125～0.02mg/ml；

S3、抑菌圈的测量：测量培养结束后的各平板中的抑菌圈直径，根据抑菌圈直径的大小定性判定植物防腐剂KM的防腐效力；若所述抑菌圈直径小于10mm，则判定所述植物防腐剂KM的抑菌效果较差；若所述抑菌圈直径在10mm以上，判定所述植物防腐剂KM的抑菌效果较好且抑菌圈的直径越大，抑菌效果越好。

2.根据权利要求1所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：若所述抑菌圈的直径大于20mm，则表明抑菌效果极佳。

3.根据权利要求1所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：所述防腐剂的添加体积为10～20μl；优选为15μl。

4.根据权利要求1所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：所述防腐剂的浓度为0.0025g/ml。

5.根据权利要求1所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：所述步骤S1具体包括以下步骤：将微生物菌种经复苏培养后确定菌液初始浓度，并稀释得到最终浓度为10⁵～10⁶cfu/ml浓度的菌悬液。

6.根据权利要求5所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：将复苏后的微生物菌种培养至第2代或第3代时，确定菌液初始浓度，并稀释得到最终浓度为10⁵～10⁶cfu/ml浓度的菌悬液。

7.根据权利要求6所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：通过稀释涂布平板法确定菌液中微生物的浓度。

8.根据权利要求5所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：所述大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯氏菌均采用LB培养基进行培养，所述白假丝酵母菌选用麦芽浸膏培养基培养，所述黑曲霉菌选用PDA培养基进行培养。

9.根据权利要求1所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：所述步骤S2中，在已灭菌的平板中添加菌悬液80～120μl，优选为100μl。

10.根据权利要求1所述的快速判定植物防腐剂KM防腐效力的方法，其特征在于：所述孔为方孔，所述方孔为0.5cm*0.5cm的正方形结构。