[发明专利]软骨糖蛋白的高效拆分方法在审
申请号: | 201910445929.8 | 申请日: | 2019-05-27 |
公开(公告)号: | CN110257461A | 公开(公告)日: | 2019-09-20 |
发明(设计)人: | 张春晖;沈青山;李侠;王航;贾伟;刘云鹤 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农产品加工研究所 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;C08B37/08 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 史霞 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 软骨 热压 液化液 糖蛋白 蒸馏水 软骨组织 酶解液 胰蛋白酶 木瓜蛋白酶 强碱 二次酶解 软骨多糖 一次酶解 均质 酶解 制备 | ||
1.软骨糖蛋白的高效拆分方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、向软骨组织中加入蒸馏水并置于热压罐中进行热压拆分,得到软骨液化液;
步骤二、向软骨液化液中加入胰蛋白酶进行一次酶解,然后加入木瓜蛋白酶进行二次酶解,灭酶,得到酶解液;
步骤三、将酶解液进行分离,分别得到软骨多糖和软骨肽。
2.如权利要求1所述的软骨糖蛋白的高效拆分方法,其特征在于,步骤一中,软骨组织与蒸馏水的质量比为1:1.5~2.5。
3.如权利要求1所述的软骨糖蛋白的高效拆分方法,其特征在于,步骤一中,软骨液化液的制备方法为:将软骨组织和蒸馏水置于热压罐中,置于0.07~0.1MPa、110~120℃条件下热压拆分0.5~2.5h,热压拆分后,置于1000~1500rpm条件下均质10~20s,过滤,即得到软骨液化液。
4.如权利要求1所述的软骨糖蛋白的高效拆分方法,其特征在于,步骤二中,酶解液的制备方法为:向软骨液化液中加入胰蛋白酶,并置于50~60℃的条件下进行一次酶解,酶解1~2h,然后加入木瓜蛋白酶并置于50~60℃的条件下进行二次酶解,酶解1~2h,二次酶解结束后置于100℃的水浴中3~5min进行灭酶,其中,软骨液化液与胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的用量比为1:0.015~0.045:0.015~0.03。
5.如权利要求1所述的软骨糖蛋白的高效拆分方法,其特征在于,步骤三中,将酶解液进行分离的方法为:先将酶解液使用微滤膜进行过滤,得到第一截留物和第一滤液,将第一滤液使用超滤膜进行过滤,得到第二截留物和第二滤液,将第一截留物与第二滤液合并并干燥,即得到软骨肽,将第二截留物干燥,即得到软骨多糖。
6.如权利要求1所述的软骨糖蛋白的高效拆分方法,其特征在于,步骤一中,在进行热压拆分前将软骨组织进行预处理,预处理的方法为:将软骨组织中附着的肉、筋膜剔除,并使用水清洗软骨组织。
7.如权利要求1所述的软骨糖蛋白的高效拆分方法,其特征在于,软骨组织为胸软骨、肋骨软骨或者喉软骨中的一种。
8.如权利要求1所述的软骨糖蛋白的高效拆分方法,其特征在于,步骤二中,软骨液化液在进行酶解前进行预处理,预处理的方法为;先测量软骨液化液中可溶性固形物的含量,然后用蒸馏水将软骨液化液稀释至可溶性固形物的含量为0.5~1%。
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