[发明专利]一种糖基化柚皮素的制备方法及其应用

说明书

本公开提供了一种糖基化柚皮素的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：将原料和糖基供体放入到反应缓冲液中，料液混合均匀后，然后在反应体系加入糖苷酶和糖基转移酶，所述原料为柚皮苷、柚皮素的提取物或转化物及其衍生物。所述方法中所制备的糖基化柚皮素因为在黄酮母体上增加上了1‑9个糖基，使的柚皮素的溶解度大幅提高，既解决了柚皮素溶解度差的问题，又解决了柚皮素在人体内的分解吸收的问题，大大提高了柚皮素的生物利用度。

技术领域

本公开涉及生物工程领域，具体涉及一种糖基化柚皮素的制备方法及其应用。

背景技术

柑橘是我国种植面积最大的水果之一，每年有大量的柑橘类的小果、疏果、次果等。这些果一般就被直接扔掉了，造成了大量资源的浪费。文献报道：柑橘的小果、疏果和落果中的柑橘橙皮苷在整个生长周期中的含量最高。因此利用柑橘生长过程中产生的小果、疏果和落果等提取黄酮化合物，具有很高的经济价值。

黄酮化合物是大自然给予人类的瑰宝，目前已经探明大约有4000种黄酮化合物，主要存在于植物的叶、果实、根、皮中，而且相似的母核结构，但母核上取代基结构类型复杂多样。其中柚皮素为二氢黄酮类化合物，是柚皮苷的苷元，别名柑桔素、柚苷元、柑橘素，存在于多种植物中，可以从多种植物中提取，也可以从柚皮苷水解得到，柚皮素具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、清除自由基、解痉和利胆等作用。

近年来对柚皮素的活性研究十分活跃和深入，但柚皮素在天然植物中的含量并不高，且需要复杂的提取、分离工艺，这直接影响了对其药理活性的研究。目前，制备柚皮素的方法有酸水解法、水相-乙醇法、甲醇法、环己醇法等制备橙皮素方法，但使用上述方法所制备的柚皮素的溶解度低，使得柚皮素的生物利用率低，效果不明显。

发明内容

本公开的目的是提供一种糖基化柚皮素的制备方法，以达到提高柚皮素的溶解度，增加生物利用率的目的。

为实现上述目的，技术方案如下：

一种糖基化柚皮素的制备方法，其具体步骤包括：

将原料和糖基供体放入到反应缓冲液中，料液混合均匀后，然后在反应体系加入糖苷酶和糖基转移酶。

所述原料为柚皮苷、柚皮素的提取物或转化物及其衍生物。

所述糖基供体为葡萄糖、UDP-葡萄糖、木糖、UDP-木糖、半乳糖、UDP-半乳糖、赤藓糖、α-环糊精、β-环糊精、淀粉、木聚糖、蔗糖或麦芽糊精，所述糖基供体的浓度为1-10g/L。

所述反应缓冲液为磷酸氢二钠-柠檬酸钠缓冲液或质量分数为0.9％的NaCl缓冲液，其中所述磷酸氢二钠-柠檬酸钠缓冲液的质量分数为0.05-1％。

所述方法中的原料与反应缓冲液的比例为(1：10)-(1:50)。

所述反应缓冲液的pH值为2-10，反应温度为35-75℃，所述反应的时间为1-24h。

所述的糖苷酶为鼠李糖苷酶，糖基转移酶为糖基转移酶，葡萄糖基转移酶、木糖基转移酶和半乳糖基转移酶中的一种或两种组合。

所述添加的糖苷酶与糖基转移酶的比例为(5：95)-(95：5)，所述两种酶总量的质量分数为添加原料的5％-50％，所述质量分数进一步优化为10％-30％。

根据上述方法所得糖基化柚皮素的结构为：