[发明专利]一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置及浓缩工艺

说明书

本发明公开了一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置及浓缩工艺，一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置，包括分离离心机主体、放置箱、转动控温组件、试管夹持组件、试管、铰链、顶盖、密封套环、密封垫、磁铁块和轴承，所述分离离心机主体的外壁设置有放置箱；该设置，其中转动盘上能进行多个试管的放置，使能进行多组离心分离，利于大体积干细胞外泌体的浓缩提取；提高了外泌体浓缩提取的效率；通过密封套环和密封垫的设置，保证离心机内部的密封，避免了分离浓缩时细胞的污染；能通过冷凝管和温度计配合使用能进行离心机内部温度的控制，工艺中对离心时间、离心温度和离心速度进行规范，提高了后期外泌体分离浓缩的质量。

技术领域

本发明涉及细胞分离技术领域，具体为一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置及浓缩工艺。

背景技术

细胞外泌体是由细胞内多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外隙或生物学体液中的膜性囊泡，参与人体许多重要的生理或病例过程，在细胞通讯、细胞迁移、促进组织修复或调节免疫反应等作用，具有广阔的应用前景，获得高纯度的细胞外泌体一直是展开应用研究的前提；传统外泌体浓缩提取方法主要采用超速离心法或昂贵的试剂盒过柱子法，在超速离心法的过程中使用的分离离心机结构较为传统，不能进行大体积干细胞外泌体的浓缩提取，且不能保证离心机内部的密封，容易造成细胞污染，影响外泌体的提取，在现有干细胞外泌体的浓缩工艺中，其中离心时间或者离心速度没有进行规范，影响外泌体的分离浓缩工艺。

发明内容

本发明的目的在于提供一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置及浓缩工艺，以解决上述背景技术中提出的问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置，包括分离离心机主体、放置箱、转动控温组件、试管夹持组件、试管、铰链、顶盖、密封套环、密封垫、磁铁块和轴承，所述分离离心机主体的外壁设置有放置箱，所述放置箱的顶端内壁上设置有转动控温组件；

所述转动控温组件包括放置槽、电机、固定板、转动盘、储水腔、冷凝管和温度计，所述放置箱的顶端内壁上开设有放置槽，所述放置槽的底端外壁中心处螺栓固定有电机，所述放置槽位于电机上方的两侧内壁上焊接固定有固定板，所述放置槽位于固定板上方设置有转动盘，所述电机的输出轴一端贯穿固定板与转动盘的底端外壁中心处固定连接，所述放置箱位于放置槽两侧的内壁上开设有储水腔，所述储水腔的底端两侧内壁上固定安装有冷凝管，所述放置箱的一侧外壁上对应储水腔镶嵌安装有温度计，所述转动盘的顶端外壁上通过试管夹持组件固定有试管；

所述试管夹持组件包括固定槽、固定夹块、配合槽、弹簧、移动块和移动夹块，所述转动盘的顶端外壁上分布开设有固定槽，所述固定槽的内部放置有试管，所述固定槽位于试管一侧的内壁上镶嵌固定有固定夹块，所述固定槽位于试管另一侧的内壁上开设有配合槽，所述配合槽的一侧内壁上焊接固定有弹簧，所述配合槽内部位于弹簧一侧的内壁上设置有移动块，所述移动块的一侧外壁上焊接固定有移动夹块，且移动夹块的一端贯穿于配合槽的外部与试管的一侧外壁接触连接，所述放置箱的顶端一侧外壁上通过铰链连接有顶盖，所述底端外壁中心处对应试管固定连接有密封套环。

一种大体积干细胞外泌体的浓缩工艺，包括以下步骤，步骤一，干细胞培养；步骤二，装置用前处理；步骤三，外泌体粗液提取；步骤四，离心浓缩；步骤五，干细胞外泌体提取；

其中上述步骤一中，筛选出细胞状态良好、增殖能力强的间质干细胞，将间质干细胞放置到培养基中培养2～3天，其中在在细胞培养基中添加干扰素、EPO和PDGF-BB；

其中上述步骤二中，取用大体积干细胞外泌体分离浓缩装置，通过用医用杀菌液对装置放置槽内部进行擦拭，并用高温进行烘干，完成分离浓缩装置的用前处理；

其中上述步骤三中，对步骤一中集培养基的上清液进行收集，将上清液装入到离心试管中，再将离心试管插接夹持在装置的转动盘上，通过分离浓缩装置工作对上清液进行离心，离心后收集试管中的上层液，得到干细胞外泌体粗液；