[发明专利]一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置及浓缩工艺

权利要求书

1.一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置，包括分离离心机主体(1)、放置箱(2)、转动控温组件(3)、试管夹持组件(4)、试管(5)、铰链(6)、顶盖(7)、密封套环(8)、密封垫(9)、磁铁块(10)和轴承(11)，其特征在于：所述分离离心机主体(1)的外壁设置有放置箱(2)，所述放置箱(2)的顶端内壁上设置有转动控温组件(3)；

所述转动控温组件(3)包括放置槽(31)、电机(32)、固定板(33)、转动盘(34)、储水腔(35)、冷凝管(36)和温度计(37)，所述放置箱(2)的顶端内壁上开设有放置槽(31)，所述放置槽(31)的底端外壁中心处螺栓固定有电机(32)，所述放置槽(31)位于电机(32)上方的两侧内壁上焊接固定有固定板(33)，所述放置槽(31)位于固定板(33)上方设置有转动盘(34)，所述电机(32)的输出轴一端贯穿固定板(33)与转动盘(34)的底端外壁中心处固定连接，所述放置箱(2)位于放置槽(31)两侧的内壁上开设有储水腔(35)，所述储水腔(35)的底端两侧内壁上固定安装有冷凝管(36)，所述放置箱(2)的一侧外壁上对应储水腔(35)镶嵌安装有温度计(37)，所述转动盘(34)的顶端外壁上通过试管夹持组件(4)固定有试管(5)；

所述试管夹持组件(4)包括固定槽(41)、固定夹块(42)、配合槽(43)、弹簧(44)、移动块(45)和移动夹块(46)，所述转动盘(34)的顶端外壁上分布开设有固定槽(41)，所述固定槽(41)的内部放置有试管(5)，所述固定槽(41)位于试管(5)一侧的内壁上镶嵌固定有固定夹块(42)，所述固定槽(41)位于试管(5)另一侧的内壁上开设有配合槽(43)，所述配合槽(43)的一侧内壁上焊接固定有弹簧(44)，所述配合槽(43)内部位于弹簧(44)一侧的内壁上设置有移动块(45)，所述移动块(45)的一侧外壁上焊接固定有移动夹块(46)，且移动夹块(46)的一端贯穿于配合槽(43)的外部与试管(5)的一侧外壁接触连接，所述放置箱(2)的顶端一侧外壁上通过铰链(6)连接有顶盖(7)，所述底端外壁中心处对应试管(5)固定连接有密封套环(8)。

2.一种大体积干细胞外泌体的浓缩工艺，包括以下步骤，步骤一，干细胞培养；步骤二，装置用前处理；步骤三，外泌体粗液提取；步骤四，离心浓缩；步骤五，干细胞外泌体提取；其特征在于：

其中上述步骤一中，筛选出细胞状态良好、增殖能力强的间质干细胞，将间质干细胞放置到培养基中培养2～3天，其中在在细胞培养基中添加干扰素、EPO和PDGF-BB；

其中上述步骤二中，取用大体积干细胞外泌体分离浓缩装置，通过用医用杀菌液对装置放置槽(31)内部进行擦拭，并用高温进行烘干，完成分离浓缩装置的用前处理；

其中上述步骤三中，对步骤一中集培养基的上清液进行收集，将上清液装入到离心试管(5)中，再将离心试管(5)插接夹持在装置的转动盘(34)上，通过分离浓缩装置工作对上清液进行离心，离心后收集试管(5)中的上层液，得到干细胞外泌体粗液；

其中上述步骤四中，将步骤三中得到的干细胞外泌体粗液装入到另一离心试管(5)中，再将试管(5)装入到分离浓缩装置的转动盘(34)上，通过分离浓缩装置工作对干细胞外泌体粗液进行超滤浓缩离心，得到浓缩液；

其中上述步骤五中，将步骤四中得到的浓缩液加入无菌PBS溶解后加入外泌体提取液进行孵育，孵育后得第二孵化液，将第二孵化液进行离心收集底部沉淀，得细胞外泌体。

3.根据权利要求1所述的一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置，其特征在于：所述放置箱(2)位于放置槽(31)顶端开口处的两侧外壁上贴合有密封垫(9)。

4.根据权利要求1所述的一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置，其特征在于：所述电机(32)输出轴与固定板(33)的转动连接处镶嵌固定有轴承(11)。

5.根据权利要求1所述的一种大体积干细胞外泌体分离浓缩装置，其特征在于：所述固定夹块(42)与移动夹块(46)的两侧外壁上开设有圆弧边，且固定夹块(42)与移动夹块(46)的外壁上贴合固定有海绵垫。