[发明专利]特异性检测蓝舌病病毒的单抗及其杂交瘤细胞株和应用

权利要求书

1.一种分泌抗蓝舌病病毒NS2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为BTV-2A4，保藏在中国典型培养物保藏中心，菌种保藏编号：CCTCC NO：C2018232。

2.一种权利要求1所述杂交瘤细胞株所分泌的抗蓝舌病病毒NS2蛋白的单克隆抗体。

3.一个与权利要求2所述单克隆抗体发生特异性结合的蓝舌病病毒NS2蛋白的B细胞表位多肽，其特征在于：所述表位多肽的氨基酸序列在91 ~ 138区间内，所述氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

4.权利要求2所述抗蓝舌病病毒NS2蛋白的单克隆抗体在制备蓝舌病病毒诊断试剂或检测试剂中的应用。

5.权利要求3所述蓝舌病病毒NS2蛋白B细胞表位多肽在制备诊断或检测蓝舌病病毒感染的试剂中的应用。

6.一种以权利要求2所述单克隆抗体制备的特异性检测蓝舌病病毒NS2蛋白的C-ELISA试剂盒，其特征在于，所述C-ELISA试剂盒包括酶标板，还包括如权利要求2所述的抗蓝舌病病毒NS2蛋白的单克隆抗体，及抗鼠的酶标二抗、阳性对照、阴性对照、稀释液、TMB显色液、洗涤液和终止液。

7.根据权利要求6所述C-ELISA试剂盒，其特征在于，所述酶标板由抗原蛋白包被，所述抗原蛋白为细菌Trx A蛋白与蓝舌病病毒NS2蛋白片段的融合蛋白，其序列如SEQ ID NO.3所示；所述蓝舌病病毒NS2蛋白片段的序列为1型蓝舌病病毒Seg8基因编码的1 ~ 228位氨基酸序列，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

8.根据权利要求6所述特异性检测蓝舌病病毒NS2蛋白的C-ELISA试剂盒，其特征在于，所述抗鼠的酶标二抗为HRP标记的羊抗鼠IgG，所述所述阳性对照为自然感染蓝舌病病毒1型的BTV抗体阳性血清；所述阴性对照为蓝舌病病毒抗体阴性的血清；所述稀释液为含有5%（W/V）脱脂奶的PBS缓冲液；所述洗涤液为PBS缓冲液。

9.根据权利要求7所述特异性检测蓝舌病病毒NS2蛋白的C-ELISA试剂盒，其特征在于，所述包被酶标板的TrxA-NS2抗原蛋白为经过钴离子树脂纯化的多肽，其包被量为100 ng/孔；所述单克隆抗体的稀释倍数为160倍；所述酶标二抗的稀释倍数为2000倍；孵育时间均为1 h，TMB显色时间为10 min。

10.根据权利要求7所述特异性检测蓝舌病病毒NS2蛋白的C-ELISA试剂盒，其特征在于，待测血清用量为25μl/孔。