[发明专利]一种制首乌的质量检测方法

说明书

本发明属于中药质量标准检测的技术领域，公开了制首乌的质量检测方法。采用高效液相色谱法建立制首乌指纹图谱；以红细胞计数、血红蛋白含量、红细胞压积和血小板计数评价其益精血活性。通过灰色关联度分析方法进行谱‑效相关分析，确定制首乌醇溶部位及小分子糖部位中主要有效成分分别为16种和5种，建立制首乌中醇溶部位和小分子糖部位的质量标准，其中醇溶部位主要活性成分峰占比不得低于61.93％，小分子糖部位主要活性成分峰占比不得低于62.58％。本发明所提供的方法基于制首乌谱效关系，建立了一种可通过制首乌指纹图谱直接判定其益精血活性的质控模式，具有简便快捷、客观准确等优点，使制首乌的质量控制体系更加科学、完善。

技术领域

本发明属于中药质量标准检测的技术领域，具体是涉及一种制首乌的质量检测方法，尤其是基于谱效关系的制首乌的益精血活性的质量检测方法。

背景技术

何首乌(Polygonum multiflorum Thunb.)又名多花蓼、紫乌藤、夜交藤等，是蓼科蓼族何首乌属多年生缠绕藤本植物，块根肥厚，长椭圆形，黑褐色。何首乌其块根又称生首乌，可以直接入药。生首乌味苦、甘、色，性微温，归肝、心、肾经，具有解毒、消痈、截疟和润肠通便的功效，临床上常用于疮痈、瘰疬、风疹瘙痒、久疟体虚、肠燥便秘等。

生首乌经过深加工，可得制首乌。生首乌经清蒸或用黑豆汁拌匀后蒸至内外均呈棕褐色，成为制首乌。制首乌表面黑褐色或棕褐色，凹凸不平。质坚硬，断面角质样，棕褐色或黑色。气微，味微甘而苦涩。制首乌功偏补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨、化浊降脂，临床上为血虚微黄、眩晕耳鸣、须发早白、腰膝酸软常用药。制首乌微温不燥，补而不腻，《本草纲目》云：“养血益肝，固精益肾，健筋骨，乌须发，为滋补良药”，甚至誉其“不寒不燥，功在地黄、天冬诸药之上”。

然而目前市场上制首乌品质参差不齐，致其功效受到不同程度的影响，目前针对制首乌的质量标准均仅着眼于少数活性成分的定性分析，而针对制首乌谱效关系的研究寥寥无几。故而，目前尚缺乏对制首乌药材优劣性的有效科学的质量评估方法，尤其是检测制首乌的益精血活性的优劣性的方法。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种借助灰关联度分析法，将制首乌的指纹图谱与其益精血活性进行谱效相关性研究以获得可通过其指纹图谱以直接预测其益精血活性，从而判断制首乌品质的制首乌的质量检测方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

一种制首乌的质量检测方法，包括如下步骤：

(1)制备制首乌的醇溶部位和小分子糖部位；

(2)建立制首乌的醇溶部位和小分子糖部位的指纹图谱；

(3)制首乌醇溶部位和小分子糖部位的益精血药效学研究，

(4)应用灰色关联分析法确定制首乌指纹图谱中共有峰与其益精血药效的关联度，从而确定制首乌中醇溶部位和小分子糖部位的不同共有峰对其益精血药效的影响；

(5)根据制首乌中醇溶部位和小分子糖部位的不同共有峰对其益精血药效的影响建立质量标准，利用所建立的质量标准直接评价制首乌质量。

其中，作为优选，步骤1)中所述制首乌醇溶部位的制备方法为取制首乌粉末加水提取，浓缩提取液，加入无水乙醇至含醇量为50％，离心；上清液加无水乙醇浓缩至含醇量为80％，离心；浓缩上清液，用D101型大孔树脂富集，水洗脱后，以95％乙醇洗脱即得。

作为优选，步骤1)中所述制首乌小分子糖部位的制备方法为取制首乌粉末加水提取，浓缩提取液，加入无水乙醇，离心；上清液加无水乙醇浓缩，离心；收集沉淀溶解，加无水乙醇浓缩，离心；上清液干燥即得。