[发明专利]一种防治植物病害的微生物菌剂的制备方法在审
申请号: | 201910407764.5 | 申请日: | 2019-05-16 |
公开(公告)号: | CN110184198A | 公开(公告)日: | 2019-08-30 |
发明(设计)人: | 徐钟杰;宁凯;檀会珍;郭涌梁;董生;赵淑芳 | 申请(专利权)人: | 杭州市园林工程有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/20;A01N63/00;A01N63/04;A01P5/00;C12R1/79;C12R1/10;C12R1/085;C12R1/065;C12R1/11;C12R1/01 |
代理公司: | 合肥市科融知识产权代理事务所(普通合伙) 34126 | 代理人: | 陈思聪 |
地址: | 310002*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 混合发酵液 微生物菌剂 制备 防治植物病害 革兰氏阳性放线菌 地衣芽孢杆菌 蜡状芽孢杆菌 混合菌液 鞘氨醇 杆菌 淡紫拟青霉菌 巨大芽孢杆菌 改性硅藻土 微生物防治 根结线虫 剩余原料 有效抑制 植物病害 虫卵 病源菌 腐殖酸 固氮菌 光合菌 几丁质 菌抑菌 氨基酸 单糖 菌液 菌种 配制 繁殖 生长 土壤 | ||
1.一种防治植物病害的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤如下:
1)准备包括以下按照重量份的原料:淡紫拟青霉菌二次菌液10-20份、地衣芽孢杆菌-鞘氨醇杆菌混合发酵液6-10份、革兰氏阳性放线菌-蜡状芽孢杆菌混合发酵液4-8份、固氮菌6-8份、巨大芽孢杆菌2-6份、光合菌2-4份、氨基酸8-12份、腐殖酸1-3份、单糖1-3份、几丁质3-7份、改性硅藻土4-6份;
2)将地衣芽孢杆菌和鞘氨醇杆菌制成地衣芽孢杆菌-鞘氨醇杆菌混合发酵液;
3)将革兰氏阳性放线菌和蜡状芽孢杆菌制成革兰氏阳性放线菌-蜡状芽孢杆菌混合发酵液;
将淡紫拟青霉菌二次菌液、步骤2)中得到的地衣芽孢杆菌-鞘氨醇杆菌混合发酵液以及步骤4)中得到的革兰氏阳性放线菌-蜡状芽孢杆菌混合发酵液混合,边搅拌边加入固氮菌、巨大芽孢杆菌、光合菌,混合均匀,得到混合菌液A;
5)将氨基酸、腐殖酸、单糖、几丁质、改性硅藻土加入混合菌液A中,搅拌均匀后,进行高温喷雾干燥,温度为160-180℃,进料流速为2-4L/min,最终得到防治植物病害的微生物菌剂。
2.根据权利要求1所述的防治植物病害的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述淡紫拟青霉菌二次菌液的制备方法如下:将淡紫拟青霉菌菌种接种于第一培养基中,培养得到荧光单细胞杆菌一次菌液,接着将淡紫拟青霉菌一次菌液接种于第二培养基中,培养得到淡紫拟青霉菌二次菌液。
3.根据权利要求2所述的防治植物病害的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述第一培养基包括以下按照重量份的原料:蛋白胨2-20份、磷酸氢二钾0.5-1.5份、硫酸镁0.5-1.8份、琼脂10-25份、无菌水1000份,所述第一培养基的PH值为7.2±0.2;所述第二培养基包括以下按照重量份的原料:蛋白胨5-20份,酵母膏0.5-5份,氯化钠5-10份,琼脂10-20份,蒸馏水1000份;所述第二培养基的PH值为7.0。
4.根据权利要求1所述的防治植物病害的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述地衣芽孢杆菌-鞘氨醇杆菌混合发酵液的制备方法为:将地衣芽孢杆菌和鞘氨醇杆菌种子液接种在PDB液体培养基中,并在24-28℃温度条件下进行有氧发酵培养24-96h,得到所需地衣芽孢杆菌-鞘氨醇杆菌混合发酵液。
5.根据权利要求4所述的防治植物病害的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤3)中所述革兰氏阳性放线菌-蜡状芽孢杆菌混合发酵液的制备方法为:将革兰氏阳性放线菌、蜡状芽孢杆菌利用接种环挑取菌落分别接种至LB培养基中进行培养,培养温度为32℃,在往复式振荡器中振荡速度为120rpm,培养24h后,转接发酵培养基,进行发酵24-36h,接种量为发酵总体积的1-3%。
6.根据权利要求1所述的防治植物病害的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述单糖为蔗糖或葡萄糖。
7.根据权利要求6所述的防治植物病害的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述改性硅藻土的制备方法为:将硅藻土加入到PH=0.01-0.5的硝酸溶液中,配置成重量百分比浓度为20-50%的浆液,煮沸、冷却、抽滤、洗涤、干燥、煅烧,得到改性硅藻土,其中干燥温度为60-120℃,干燥10-30h,煅烧温度为400-650℃,煅烧时间为10-20h。
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