[发明专利]一种高效、快速分离制备大黄酸衍生物的方法

说明书

本发明公开了一种高效、快速分离制备大黄酸衍生物的方法，将待分离混合物加入高速逆流色谱进行分离，分别得到大黄酸、1‑乙酰大黄酸、8‑乙酰大黄酸和双醋瑞因的流份，再经过减压浓缩、干燥得到大黄酸、1‑乙酰大黄酸、8‑乙酰大黄酸和双醋瑞因单体；所述的高速逆流色谱采用的溶剂体系为烃类溶剂‑酯类溶剂‑醇类溶剂‑水‑有机酸体系。该方法可以有效地分离大黄酸、1‑乙酰大黄酸、8‑乙酰大黄酸和双醋瑞因这几种难以分离的单体，具有高效提纯，大制备量，低使用成本，易工艺放大，高回收率等独特优势。

技术领域

本发明属于分离制备领域，具体涉及高速逆流色谱法分离大黄酸、1-乙酰大黄酸、8-乙酰大黄酸和双醋瑞因混合物的方法。

背景技术

大黄酸为蓼科植物大黄、何首乌、虎杖等多种传统中药的主要成分之一，具有抗肿瘤、抗炎、抗纤维化、抗菌、免疫抑制、利尿、泻下等多种药理活性，加之其低毒、安全的特点，受到了广大研究者的关注。

大黄酸因水溶性差、生物利用度低等缺陷，极大程度上限制了它的临床应用。因此，药物化学家们通过母核取代、羟基取代、羧基修饰等方面的改造，提高药效、改善理化性质等，进一步深入对大黄酸及其衍生物的研究，以期从中开发出新的具有临床价值的药物。大黄酸乙酰化合成产物双醋瑞因是一种新型的白细胞介素-1抑制剂，1994年，双醋瑞因首先在法国开始用于临床。目前已在欧洲、亚洲和美洲的许多国家得到广泛的应用。

在合成双醋瑞的过程中，会产生大黄酸单乙酰化合成产物。大黄酸单乙酰化合成产物1-乙酰大黄酸和8-乙酰大黄酸结构相似，常规色谱法难于对其进行分离，致使无法对其进行进一步的活性研究，因此找出一种高效、快速制备大黄酸衍生物的方法具有十分重要的意义。其中，大黄酸(1)、1-乙酰大黄酸(2)、8-乙酰大黄酸(3)和双醋瑞因(4)结构式如下：

本发明所涉及得采用高速逆流色谱法分离大黄酸、1-乙酰大黄酸、8-乙酰大黄酸和双醋瑞因混合物的方法，迄今为止，以上研究成果尚未有专利或文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用高速逆流色谱制备大黄酸、1-乙酰大黄酸、8-乙酰大黄酸和双醋瑞因单体的方法，该方法操作简单，分离效率高。

一种高效、快速分离制备大黄酸衍生物的方法，将待分离混合物加入高速逆流色谱进行分离，分别得到大黄酸、1-乙酰大黄酸、8-乙酰大黄酸和双醋瑞因的流份，再经过减压浓缩、干燥得到大黄酸、1-乙酰大黄酸、8-乙酰大黄酸和双醋瑞因单体；

所述的高速逆流色谱采用的溶剂体系为烃类溶剂-酯类溶剂-醇类溶剂-水-有机酸体系。

作为优选，所述的烃类溶剂为石油醚、正己烷或者环己烷；

所述的酯类溶剂为乙酸乙酯、乙酸丙酯或者乙酸丁酯；

所述的醇类溶剂为甲醇或者乙醇；

所述的有机酸为冰乙酸、甲酸或者三氟乙酸。

作为进一步的优选，所述的溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水-冰乙酸；

所述的石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水-冰乙酸的体积比为3～5:0.5～2:2～5:0.5～2:0.005～0.5。采用该溶剂体系时，分离效率高，得到的各个单体具有更高的纯度。

作为优选，高速逆流色谱仪采用的连接方式为正接反转。

作为优选，所述的高速逆流色谱仪转速为700～1000r/min，流动相流速为2.0-3.0ml/min，柱温为20～30℃。

作为优选，所述的高速逆流色谱仪采用紫外检测器进行检测。

作为进一步的优选，本发明的分离方法包括以下具体步骤：