[发明专利]血液中辅酶Q10的提取方法和检测方法在审
申请号: | 201910404755.0 | 申请日: | 2019-05-16 |
公开(公告)号: | CN110231425A | 公开(公告)日: | 2019-09-13 |
发明(设计)人: | 禤学怡;刘伟霞;佘旭辉;赵蓓蓓;程雅婷 | 申请(专利权)人: | 广州金域医学检验中心有限公司 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/14;G01N30/02 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 向薇;王雯雯 |
地址: | 510300 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 辅酶 血液样品 氧化反应 不溶物 固体物 提取物 样品液 血液 去除 检测 溶解 监测器 液相色谱仪 第二溶剂 第一溶剂 分离提取 固定波长 有效分离 准确检测 紫外吸收 取样量 全波长 溶剂 | ||
1.一种血液中辅酶Q10的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
将血液样品进行氧化获得氧化反应的产物;
于所述氧化反应的产物中加入第一溶剂溶解,去除不溶物,得第一样品液;
挥干所述第一样品液中的溶剂,得固体物;再于所述固体物中加入第二溶剂溶解,去除不溶物,即可;
其中,所述第一溶剂由A溶剂和B溶剂组成;所述A溶剂选自甲醇、乙醇或乙腈,所述B溶剂选自烷烃类溶剂;
所述第二溶剂由C溶剂和D溶剂组成;所述C溶剂选自乙醇、异丙醇、正丙醇中的至少一种,所述D溶剂选自甲醇、乙腈中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的血液中辅酶Q10的提取方法,其特征在于,所述C溶剂为乙醇,所述D溶剂为甲醇。
3.根据权利要求1所述的血液中辅酶Q10的提取方法,其特征在于,所述第二溶剂中,所述C溶剂的体积百分比为10%~90%,所述D溶剂的体积百分比为90%~10%。
4.根据权利要求3所述的血液中辅酶Q10的提取方法,其特征在于,所述第二溶剂中,所述C溶剂的体积百分比为30%~70%,所述D溶剂的体积百分比为70%~30%。
5.根据权利要求1-4任一项所述的血液中辅酶Q10的提取方法,其特征在于,所述第二溶剂的用量为所述血液样品的体积的1~2.5倍。
6.根据权利要求1-4任一项所述的血液中辅酶Q10的提取方法,其特征在于,所述将血液样品进行氧化获得氧化反应的产物的操作具体为:于血液样品加入氧化剂进行氧化还原反应,获得氧化反应的产物;所述氧化剂为1,4-苯醌。
7.根据权利要求1-4任一项所述的血液中辅酶Q10的提取方法,其特征在于,所述于所述氧化反应的产物中加入第一溶剂溶解的方法为:于所述氧化反应的产物中加入所述A溶剂,震荡3分钟~15分钟,再加入所述B溶剂;
其中,所述A溶剂的用量为所述血液样品体积的1~4倍,所述B溶剂的用量为所述血液样品体积的2~20倍。
8.一种血液中辅酶Q10的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)待测样品制备:
将血液样品进行氧化获得氧化反应的产物;
于所述氧化反应的产物中加入内标物和第一溶剂,溶解,去除不溶物,得第一样品液;
挥干所述第一样品液中的溶剂,得固体物;再于所述固体物中加入第二溶剂溶解,去除不溶物,得待测样品;
其中,所述第一溶剂由A溶剂和B溶剂组成;所述A溶剂选自甲醇、乙醇或乙腈,所述B溶剂选自烷烃类溶剂;
所述第二溶剂由C溶剂和D溶剂组成;所述C溶剂选自乙醇、异丙醇、正丙醇中的至少一种,所述D溶剂选自甲醇、乙腈中的至少一种;
(2)检测
取所述待测样品,注入液相色谱仪中检测,即可;
所述液相色谱仪的条件包括:采用的流动相为乙醇的甲醇溶液或乙醇的乙腈溶液,其中乙醇的体积百分比≥2%;洗脱方式为等度或梯度洗脱。
9.根据权利要求8所述的血液中辅酶Q10的检测方法,其特征在于,所述C溶剂为乙醇,所述D溶剂为甲醇。
10.根据权利要求8所述的血液中辅酶Q10的检测方法,其特征在于,所述第二溶剂中,所述C溶剂的体积百分比为10%~90%,所述D溶剂的体积百分比为90%~10%。
11.根据权利要求8-10任一项所述的血液中辅酶Q10的检测方法,其特征在于,所述流动相中,乙醇的体积百分比为10%~30%,所述洗脱方式为等度洗脱。
12.根据权利要求8-10任一项所述的血液中辅酶Q10的检测方法,其特征在于,所述液相色谱仪的条件还包括:
色谱柱为C18色谱柱或C8色谱柱;柱温为25℃~50℃;所述流动相的流速为0.2~0.7mL/min;检测波长为273~277nm。
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