[发明专利]一种双抑制电致化学发光传感器及测定草甘膦的方法

说明书

本发明涉及农残分析测定技术领域，特别是涉及一种双抑制电致化学发光传感器以及用其测定草甘膦的方法，包括双抑制传感器制备步骤和使用该传感器测定草甘膦的操作方法等；这种双抑制传感器，利用了酶促反应和铜络合物类过氧化酶催化作用，是两种信号转换方式的结合而产生协同效应，有效提高传感器的检测灵敏度；用于草甘膦的检测，共存物质的干扰小，选择性好，灵敏度高。

技术领域

本发明涉及农残分析测定技术领域，特别是涉及一种双抑制电致化学发光传感器以及用其测定草甘膦的方法，包括双抑制传感器制备步骤和使用该传感器测定草甘膦的操作方法等；这种双抑制传感器，利用了酶促反应和铜络合物类过氧化酶催化作用，是两种信号转换方式的结合而产生协同效应；通过草甘膦抑制酶促反应，同时抑制类过氧化物酶的催化作用，高灵敏测定草甘膦，共存物质的干扰小，选择性好。

背景技术

发展农药残留检测技术，尤其是快速检测技术，及时监控环境和食品中的农药残留，对于保护环境，保障人们身体健康和生命安全都具有重要意义。草甘膦是一种非选择性、灭生性除草剂，作为一种广泛使用的农药，已引起人们对于其残留潜在危害的高度关注。目前化学分析法是常规的分析方法，主要依靠草甘膦的化学性质与其他物质发生化学反应，准确度与灵敏度相对较低，不太适合草甘膦残留及痕量分析；化学发光法虽然灵敏度还不错，但是大多用于草甘膦原药的检测分析，对于食品和水质草甘膦残留分析灵敏度不是特别高；分光光度法操作简便、分析快速, 但易受其他离子的干扰；尤其是与最大吸收波长相近的物质，所以在草甘膦残留量检测分析中研究中并不多；酶联免疫吸附法具有准确性、特异性、稳定性和适用范围广、检测速度快以及费用低的特点, 但是易发生交叉反应影响检测灵敏度；草甘膦检测技术除以上介绍的几大类方法外, 还有红外光谱法、核磁共振法、分子印迹-化学发光法和色谱等联用技术等。酶生物传感器是目前农药残留快速检测技术中的研究热点之一，但是，目前对于草甘膦检测的生物传感器报道的不多，亟需开发研究新型生物传感器，包括酶生物传感器、免疫传感器和DNA传感器，以适应当前的迫切需求。

酶生物传感器可分为单酶、双酶等类型。用于农药检测的酶主要有乙酰胆碱酯酶、胆碱氧化酶、有机磷水解酶等。双酶生物传感器是将乙酰胆碱酯酶(AChE)与胆碱氧化酶(ChOX)耦合。AChE水解其天然底物生成胆碱和乙酸，由于胆碱没有电化学活性，使用ChOX将胆碱氧化，消耗氧而生成H₂O₂，可用电流型酶电极测定溶液中消耗的O₂或生成的H₂O₂来检测有机磷和氨基甲酸酯类农药的含量。与本发明相近的是Shihua Hou等人报道的方法：将金纳米粒子吸附在含有多壁碳纳米管和ChOX的硫醇化硅溶胶上，再将AChE由二烯丙基二甲基氯化铵（PDDA）层层组装到修饰电极上，得到双酶传感器。利用安培法在+0.65Ｖ检测H₂O₂，但是由于此工作电位比较高，双酶体系安培法容易受到其它共存电活性物质的干扰。

发明内容

本发明的目的就是针对草甘膦分析检测研究中的不足，构建一种能够用于高灵敏检测农药残留草甘膦的双抑制电致化学发光传感器。本发明要解决的技术问题是基于酶促反应和Cu²⁺具有的类过氧化酶催化作用，发挥两种信号转换方式的协同效应，构建双抑制电致化学发光传感器，用于草甘膦的检测，有效提高传感器的检测灵敏度和选择性。

本发明的技术方案