[发明专利]一种双抑制电致化学发光传感器及测定草甘膦的方法

权利要求书

1.一种双抑制电致化学发光传感器在检测草甘膦中的应用，其特征在于，双抑制电致化学发光传感器制备方法如下：

(1)将2.0μL乙酰胆碱酯酶和10μL胆碱氧化酶滴涂到Au-rGO修饰玻碳电极Au-rGO/GCE表面，孵化过夜，得修饰电极AChE-ChOx/Au-rGO/GCE；

(2)在电极表面滴加8.0μL鲁米诺-Au-L-cys-Cu²⁺复合材料，同时以戊二醛在4℃孵化2h进行交联，制得鲁米诺-Au-L-cys-Cu²⁺/AChE-ChOx/Au-rGO/GCE；

上述各步骤孵化后均用pH 7.4的PBS缓冲液轻轻冲洗，除去物理吸附的材料；

所述的Au-rGO/GCE，制备方法如下：

(1)将玻碳电极在麂皮上依次用0.3、0.05μm Al₂O₃粉抛光成镜面，然后用超纯水冲洗掉表面的Al₂O₃，并依次在乙醇和超纯水中各超声10s，室温下晾干备用；

(2)将8.0μL的Au-rGO滴在GCE表面并在室温下晾干，得Au-rGO /GCE修饰电极；

所述的鲁米诺-Au-L-cys-Cu²⁺复合材料制备步骤如下：

(1)将1.0mL、15mmol/L鲁米诺和5.0mL、0.25mmol/L HAuCl₄混合，在室温下剧烈搅拌12h，得鲁米诺-Au NPs溶液；

(2)室温下，将100μL、6.0mmol/L L-Cys水溶液加入到1.0mL鲁米诺-Au NPs溶液中，并在4℃温育5h；继续加入100.0μL、6mmol/L Cu²⁺溶液，并在室温下震荡5min，得鲁米诺-Au-L-cys-Cu²⁺复合材料；

所述草甘膦检测方法如下：

(1)将不同浓度的草甘膦滴涂于鲁米诺-Au-L-cys-Cu²⁺/AChE-ChOx/Au-rGO/GCE表面，在37℃下孵化60min，用pH 7.4的PBS缓冲液冲洗；

(2)在含有0.1mol/L氯化乙酰胆碱的pH 7.4的PBS缓冲溶液中，以制备的传感器为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极为辅助电极，在0.0～0.7V电位区间内进行循环伏安扫描，记录发光强度。