[发明专利]猪瘟-猪传染性胸膜肺炎二联亚单位的疫苗及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及兽药技术领域，具体而言，提供了一种猪瘟‑猪传染性胸膜肺炎二联亚单位的疫苗及其制备方法和应用。疫苗包括猪瘟病毒E2蛋白、血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII和血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml，以及疫苗佐剂。通过将蛋白与疫苗佐剂等体积混合乳化得到该疫苗。该疫苗可以同时预防猪瘟及由血清1型和7型猪胸膜肺炎放线杆菌引起的猪传染性胸膜肺炎，效果好，成本低。

技术领域

本发明涉及兽药技术领域，具体而言，涉及一种猪瘟-猪传染性胸膜肺炎二联亚单位的疫苗及其制备方法和应用。

背景技术

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性的猪瘟烈性传染病，每年给养猪业造成巨大经济损失。虽然目前的猪瘟兔化弱毒疫苗控制了猪瘟的大规模流行，但猪瘟仍呈散发流行。由于目前缺乏有效的疫苗免疫和流行毒株感染的鉴别诊断方法，研发和推广使用E2亚单位疫苗等标记疫苗对猪瘟的净化非常必要。

不同于传统弱毒苗，猪瘟E2疫苗的主要抗原为猪瘟病毒E2蛋白。E2蛋白是猪瘟病毒结构蛋白之一，该蛋白不仅在感染猪瘟时可以诱导大量的中和抗体产生，而且也被证实是猪瘟病毒中最为有效的免疫原。

猪瘟E2蛋白亚单位疫苗，是将E2蛋白基因重组到表达载体(昆虫杆状病毒系统、大肠杆菌、酵母或CHO系统等)中高效表达，产生大量保护性表位，然后将抗原提取后加入佐剂制成亚单位疫苗。但是这类疫苗由于其疫苗制造成本相对猪瘟活疫苗较高，单独用于免疫仔猪性价比较低。

猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumoniae，PCP)是由猪胸膜肺炎放线杆菌引起的猪的一种急性、热性、高度传染性的呼吸道疾病。该病可造成巨大的经济损失，各年龄阶段的猪只皆可被感染，但多发于育肥后期的猪只。感染猪只的肺脏呈出血性、坏死性、纤维素性胸膜肺炎，尤其是在季节变换或是气候有剧烈变化的时间，更易导致此呼吸道疾病的发生。由于本病的病程多属于亚急性到急性，造成猪只的大量死亡，而使猪场损失惨重。急性病例的主要临床症状包括：食欲减退、精神沉郁、发热、咳嗽、呼吸困难和/或呼吸急促，偶见呕吐。该疾病的发展进程非常快，可在几小时内造成死亡。在慢性病例中，疾病的临床症状不明显，但生产成绩会受到影响，屠宰时可发现胸腔粘连、胸膜炎、肺脏脓肿等病变。

该病发生具有季节性，每年多发生于4～5月和9～12月份。饲养环境突然发生改变、转群、混群、长途运输、饲养密度过大、通风不良、潮湿、气温多变等应激因素，均可促使本病的发生与流行，增加发病率与死亡率，造成更大的经济损失。

猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae，APP)具有15个血清型，且各血清型之间的交叉保护性不强。不同的国家和地区流行的猪胸膜肺炎放线杆菌的血清型不同，我国当前在猪群中流行的血清型主要为7型，其次是血清1、2、3、4、5和10型。

目前用于控制猪传染性胸膜肺炎的疫苗有灭活疫苗、亚单位疫苗、弱毒疫苗和自家苗。灭活疫苗的使用需考虑是否与当地流行血清型一致，若一致才能起到有效的免疫保护。弱毒疫苗的使用存在安全性和毒力返强的担忧。亚单位疫苗使用效果好，不用考虑当地流行血清型的问题，因而使用范围比灭活疫苗广，但由于工艺复杂和成本高而使应用受限。市售商品疫苗类型有全菌灭活疫苗和亚单位疫苗，目前国产疫苗均为全菌灭活疫苗。

猪瘟和猪传染性胸膜肺炎的单独免疫成本都较高，目前没有有效的措施可以同时对两种疾病免疫。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于克服现有技术的缺点和不足，提供一种猪瘟-猪传染性胸膜肺炎二联亚单位的疫苗及其制备方法，以缓解现有技术中缺少一种可以同时预防猪瘟及由血清1型和7型猪胸膜肺炎放线杆菌引起的猪传染性胸膜肺炎的有效疫苗。

本发明的第二目的在于提供上述疫苗的应用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：