[发明专利]猪瘟-猪传染性胸膜肺炎二联亚单位的疫苗及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910397281.1 | 申请日： | 2019-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN110038124B | 公开（公告）日： | 2023-04-14 |
| 发明（设计）人： | 贺笋;王遵宝;郑培;李俊辉;豆智华;曹剑;张飞;唐慧芬;师小潇 | 申请（专利权）人： | 天康生物股份有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/187 | 分类号： | A61K39/187;A61K39/102;A61K39/39;A61P31/04;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 李双艳 |
| 地址： | 830000 新疆维吾尔自治区*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 猪瘟 传染性 胸膜 肺炎 二联 单位 疫苗 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种猪瘟-猪传染性胸膜肺炎二联亚单位的疫苗，其特征在于，所述疫苗包括猪瘟病毒E2蛋白、血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII和血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml，以及疫苗佐剂；
所述猪瘟病毒E2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；
编码所述血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
编码所述血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
所述猪瘟病毒E2蛋白、所述血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII和所述血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml的质量比为1:2:2；
所述疫苗佐剂为ISA563VG，所述疫苗中蛋白与疫苗佐剂的体积比为1：1；所述蛋白为所述猪瘟病毒E2蛋白、所述血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII和所述血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml。
2.根据权利要求1所述的疫苗，其特征在于，编码所述猪瘟病毒E2蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.根据权利要求1所述的疫苗，其特征在于，所述猪瘟病毒E2蛋白的制备方法包括：用昆虫杆状病毒表达系统将编码猪瘟病毒E2蛋白的基因序列重组于昆虫杆状病毒基因内，构建出猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒，将重组病毒接种于High five细胞，培养得到猪瘟病毒的E2蛋白，经灭活后，得到所述猪瘟病毒E2蛋白。
4.根据权利要求1所述的疫苗，其特征在于，所述血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII或所述血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml的制备方法包括：用大肠杆菌表达系统将编码血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII的基因序列或血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml的基因序列重组于表达载体基因内，构建出血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII重组载体或血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml重组载体，将重组载体转化入大肠杆菌细胞，培养得到所述血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII或所述血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml。
5.权利要求1-4任一项所述的疫苗的制备方法，其特征在于，将所述猪瘟病毒E2蛋白、所述血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白ApxII和所述血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白Oml，以及所述疫苗佐剂乳化制得疫苗。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，乳化的条件包括：以5000-15000r/min乳化3-6min。
7.权利要求1-4任一项所述的疫苗在制备DIVA疫苗中的应用。
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