[发明专利]一种鉴别北沙参和桔梗的试剂盒及鉴别方法

权利要求书

1.一种鉴别北沙参和桔梗的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒用于鉴别北沙参与迷果芹，或鉴别桔梗与迷果芹；所述试剂盒包括北沙参探针和桔梗探针，所述北沙参探针和桔梗探针均连接有荧光标记；其中

所述北沙参探针的序列为5′-CCGTCGTAGGA-3′；

所述桔梗探针的序列为5′-CTGCGAGGCAC-3′。

2.根据权利要求1所述的鉴别北沙参和桔梗的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括植物ITS2引物。

3.根据权利要求1所述的鉴别北沙参和桔梗的试剂盒，其特征在于，所述荧光标记连接于所述探针的5′端。

4.根据权利要求3所述的鉴别北沙参和桔梗的试剂盒，其特征在于，所述荧光标记为Cy2荧光标记或AlexaFluor488荧光标记。

5.一种鉴别北沙参和桔梗的方法，其特征在于，用权利要求1～4任一项所述的鉴别北沙参和桔梗的试剂盒对北沙参和桔梗进行鉴别。

6.根据权利要求5所述的鉴别北沙参和桔梗的方法，其特征在于，具体操作为：扩增待测物的基因组DNA，扩增完成后加入所述北沙参探针或桔梗探针进行杂交，然后电泳，荧光检测。

7.根据权利要求6所述的鉴别北沙参和桔梗的方法，其特征在于，所述杂交的方法为：向所述扩增引物中加入所述北沙参探针或桔梗探针，95℃变性5min，60℃退火1min。

8.根据权利要求6所述的鉴别北沙参和桔梗的方法，其特征在于，所述荧光检测的激发波长为488nm；和/或

所述电泳的条件为1％琼脂糖凝胶电泳，电压为180V。

9.根据权利要求6所述的鉴别北沙参和桔梗的方法，其特征在于，扩增所述基因组DNA的反应体系为：100ng基因组DNA或10ng质粒DNA，ITS2引物10pmol/μL，DNA聚合酶1×，用双蒸水补齐至50μL；

反应程序为：95℃5min，共1个循环；95℃30s，54℃30s，72℃30s，共25个循环；72℃，5min，共1个循环；

所述北沙参探针或桔梗探针的加入量为1pmol/μL。