[发明专利]组织DNA提取试剂盒

说明书

本发明涉及医疗检测领域，尤其涉及一种组织DNA提取工作液及保存管、试剂盒和提取方法。一种组织DNA保存、裂解、结合三合一工作液，该工作液包括以下的组分：0.1‑0.2 M Tris，20‑30mM EDTA，3‑5M GuSCN，1.0‑2.0 M NaCl，0.8‑1.5% SDS，1.0‑4.0% PVP，pH 9.0‑9.5；上述的百分比为质量百分比。该工作液一个试剂同时具备保存,裂解和结合三大功能，常温下即可保存样本，释放核酸，并对释放出的DNA进行结合，省时省力，提高效率，便于上机操作。

技术领域

本发明涉及医疗检测领域，尤其涉及一种组织DNA提取工作液及保存管、试剂盒和提取方法。

背景技术

核酸提取是各种分子生物学检测方法的基础，高效完整地提取DNA是PCR扩增、文库构建、测序等工作的基础。除组织器官样本外，分子生物学检测中最常用的离体样本为血液样本，但采血一方面需要专业人员使用无菌采血设备，成本和复杂程度较高，另一方面采血会给患者带来直接的疼痛和恐惧，受到很多人的排斥；由于以上原因，以血液样本进行分子生物学检测在许多情形下，特别是大范围筛查或鉴定中有诸多不便。

组织提取与血液提取相比较而言，采集动物组织操作简单、不需要抗凝剂，便于保存和携带运输。所以组织提取DNA更具优势。不过在PCR分子诊断过程中，获得的DNA的总拷贝数和质量会直接影响到后续检验实验的结果，所以，获得有效、可靠的DNA是PCR分子诊断的关键。

试剂盒法是目前临床应用广泛且最简便的方法，商品化的DNA提取试剂盒种类繁多，性能迥异，但基因组DNA提取效率不同。另外，由于临床组织样本量大，采集后通常无法及时进行DNA提取即被储存，组织中含有的大量核酸酶会对粪便DNA造成严重降解，因此，储存时间对基因组DNA提取效率的影响很大。

中国发明专利申请(公开号：CN107099527A，公开日：2017.08.29)公开了一种组织DNA快速提取试剂盒，包括组分有：组织消化液、裂解液、蛋白酶K、结合液、磁珠、洗涤液1、洗涤液2、洗脱液。所述裂解液中各成分分别为：Tris-HCl的浓度为5～11mmol/L，pH为3.5-4.5；异硫氰酸胍的浓度为5～10mmol/L；氢氧化钠浓度为3～5mmol/L；NP-40的浓度为1％～5％；EDTA-2Na的浓度为2～5mmol/L。所述结合液中各成分分别为：Tris-HCl的浓度为2～5mmol/L，pH为5.0-6.0；乙醇的浓度为85％～100％。

中国发明专利申请(公开号：CN105002159A，公开日：2015.10.28)公开了一种提取人体/动物血液和组织DNA的DNA提取试剂盒，该试剂盒由CTAB细胞裂解液、蛋白质消化酶K、Tris-HCl缓冲液和阳离子DNA层析柱组成，其中，每100mL的CTAB细胞裂解液含有1.5g的CTAB、7.5mL的1M、pH为8.0的Tris-HCl，5.85g的NaCl和3mL的0.5M、pH为8.0的EDTA。

上述两个现有技术中都是忽视了储存时间对基因组DNA提取效率的影响，并且这两个现有技术种采用的裂解液和结合液都是不同的液体，在使用的时候增加了配制的工作量，也不利于精简操作流程。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种组织DNA保存、裂解、结合三合一工作液，该工作液一个试剂同时具备保存,裂解和结合三大功能，常温下即可保存样本，释放核酸，并对释放出的DNA进行结合，省时省力，提高效率，便于上机操作。

为了实现上述的目的，本发明的一种组织DNA保存、裂解、结合三合一工作液，该工作液包括以下的组分：0.1-0.2M Tris，20-30mM EDTA，3-5M GuSCN，1.0-2.0M NaCl，0.8-1.5％SDS，1.0-4.0％PVP，pH 8.5-9.5；上述的百分比为质量百分比。