[发明专利]一种鉴别当归的试剂盒及鉴别方法有效
| 申请号： | 201910388756.0 | 申请日： | 2019-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN110106276B | 公开（公告）日： | 2023-01-17 |
| 发明（设计）人： | 刘钊;宋军娜;齐兰婷;郑玉光;严玉平;吴兰芳;韩晓伟;朱若嘉;孙会改 | 申请（专利权）人： | 河北中医学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人： | 张贵勤 |
| 地址： | 050200 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 当归 试剂盒 鉴别方法 | ||
1.一种鉴别当归的方法，其特征在于，用鉴别当归的试剂盒对当归进行鉴别，所述鉴别当归的试剂盒包括当归探针和植物ITS2引物，所述当归探针连接有荧光标记；
所述当归探针的序列为5´-CGCATCACCTT-3´；
所述方法的具体操作为：提取待测物的基因组DNA，以该基因组DNA为模板按以下体系进行PCR反应，体系：待测物基因组DNA，ITS2引物，DNA聚合酶1×，双蒸水；扩增完成后加入所述当归探针进行杂交，然后电泳，荧光检测，所述杂交的方法为：向扩增引物中加入所述当归探针，95℃变性5min，61.5℃退火1min。
2.根据权利要求1所述的鉴别当归的方法，其特征在于，所述荧光标记连接于所述探针的5´端。
3.根据权利要求2所述的鉴别当归的方法，其特征在于，所述荧光标记为Cy2荧光标记或AlexaFluor488荧光标记。
4.根据权利要求1所述的鉴别当归的方法，其特征在于，所述荧光检测的激发波长为488nm；和/或
所述电泳的条件为1%琼脂糖凝胶电泳，电压为180V。
5.根据权利要求1所述的鉴别当归的方法，其特征在于，所述PCR反应体系为：100ng基因组DNA或10ng质粒DNA，ITS2引物10pmol/µL，DNA聚合酶1×，用双蒸水补齐至50µL；
反应程序为：95℃ 5min，共1个循环；95℃ 30s，54℃ 30s，72℃ 30s，共25个循环；72℃，5min，共1个循环；
所述当归探针的加入量为1pmol/µL。
6.权利要求1所述的鉴别当归的方法在鉴别当归与独活中的应用。
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