[发明专利]含四基因的盒库、重组DNA分子及转基因棉花

权利要求书

1.具有重组多核苷酸序列的盒库，包括：

用于编码多核苷酸序列的四基因(SEQ ID NO：21)，其5'末端连接与未翻译的增强子(内含子)序列连接的启动子，和3'末端与NOS终止子连接，其中所述四基因包含：

3个吸吮害虫抗性基因，其包括：来自蕨类大齿三叉蕨(Tectaria macrodonta)的杀虫Tma12基因(SEQ ID NO：18)，1个半夏基因PTA(SEQ ID NO：19)和1个蒜(Allium sativum)基因ASAL(SEQ ID NO：20)，和

Re-PAT基因(SEQ ID NO：17)，

所述四基因经编码而在具有组成型靶向表达的转基因植物中提供杀虫和除草毒素蛋白，并导致针对杀虫毒素蛋白的抗性发展降低和对昆虫蠕动的增强的功效。

2.权利要求1的盒库，其中第一盒，第二盒，第三盒和第四盒位于侧翼为左右边界序列的载体的T-DNA区域内。

3.权利要求2的盒库，其中所述第一盒编码杀虫Tma12基因，所述第一盒具有与启动子可操作连接的SEQ ID NO：18，在基因Tma12的5'末端的未翻译增强子序列、和标记到基因Tma12的3'末端的NOS终止子序列。

4.权利要求2的盒库，其中所述第二盒编码杀虫PTA基因，所述第二盒具有与启动子可操作连接的SEQ ID NO：19，在PTA基因的5'末端的未翻译增强子序列、和标记到PTA基因的3'末端的NOS终止子序列。

5.权利要求2的盒库，其中所述第三盒编码杀虫ASAL基因，所述第三盒具有与启动子可操作连接的SEQ ID NO：20，在ASAL基因的5'末端的未翻译增强子序列、和标记到ASAL基因的3'末端的NOS终止子序列。

6.权利要求2的盒库，其中第四盒编码Re-PAT除草蛋白基因，所述第四盒具有与启动子可操作地连接的SEQ ID NO：17，在Re-PAT基因的5'末端的未翻译的增强子序列、和标记到Re-PAT基因的3'末端的NOS终止子序列。

7.权利要求2的盒库，其中具有SEQ ID NO：21的盒库存在于转基因植物或转基因植物的部分中。

8.前述权利要求的盒库，其中所述启动子是花椰菜花叶病毒(CaMV35S)启动子。

9.前述权利要求的盒库，其中转基因植物中每个基因，Tma12，PTA，ASAL基因和Re-PAT的5'末端与未翻译的增强子序列连接，所述增强子序列包含SEQ ID NO：21的从第7个核苷酸到第34个核苷酸的28个核苷酸。

10.权利要求1的盒库，其中所述转基因植物是选自玉米、甘蔗、小麦和玉米植物的单子叶植物。

11.权利要求1的盒库，其中所述转基因植物是选自棉花、马铃薯和番茄植物的双子叶植物。

12.权利要求11的盒库，其中所述双子叶植物是棉花植物。

13.权利要求1的盒库，其中所述盒库位于SEQ ID NO：26，其具有用于识别的SEQ IDNO：27的正向引物和SEQ ID NO：28的反向引物。

14.重组DNA分子，其包含选自SEQ ID NO：1～21，SEQ ID NO：26，SEQ ID NO：27和SEQID NO：28的多核苷酸序列及其互补物。

15.权利要求14的重组DNA分子，其中所述包含SEQ ID NO：1～21，SEQ ID NO：26，SEQID NO：27和SEQ ID NO：28及其互补物的DNA分子在转基因棉花植物、植物细胞、种子或植物部分中。