[发明专利]一种高效提取、纯化桦褐孔菌多糖的方法

说明书

本发明属于桦褐孔菌多糖提取方法技术领域，具体涉及一种高效提取、纯化桦褐孔菌多糖的方法。本发明主要解决了目前桦褐孔菌多糖提取方法存在提取率低、重金属含量高、有效成分易受热分解、提取成本高等问题。本发明主要包括有提取、精制和干燥等步骤，其中提取步骤采用循环柱层析提取法，精制步骤采用沉淀法，干燥步骤采用喷雾干燥或超低温冷冻干燥法。经过循环柱层析提取，桦褐孔菌多糖提取率可达80％以上，多糖纯度均可达60％以上，含水量仅为3％到4.5％，且有效成分不分解、提取成本低。

技术领域

本发明属于桦褐孔菌多糖提取方法技术领域，具体涉及一种高效提取、纯化桦褐孔菌多糖的方法。

背景技术

桦褐孔菌，又名白桦茸、桦树茸，是一种寄生在白桦、榆树和银桦等树干或树皮上的药用真菌，主要分布在北纬45°-50°的地区。多年来，桦褐孔菌作为民间药物被应用于癌症、肝病、糖尿病等多种疾病的防治和治疗方面。桦褐孔菌具有多种活性成分，如多糖、萜类、酚酸类、黑色素类及木质素等。

药用真菌多糖是真菌中十分重要的活性成分，它能够调节细胞的新陈代谢，抑制细胞的分裂，具有很高的药用价值。在临床上已经有大量的案例能够证实，真菌多糖具有提高免疫力、抗凝血、抗衰老等多种重要的作用，而且其毒副作用非常小。目前，桦褐孔菌多糖提取方法主要包括溶剂浸提法、物理方法辅助提取、酶提取等方法，但存在提取率低、重金属含量高、有效成分易受热分解、提取成本高等问题。

发明内容

本发明针对上述技术问题，提供一种高效提取、纯化桦褐孔菌多糖的方法。

解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种高效提取、纯化桦褐孔菌多糖的方法，包括以下步骤：

1)原料预处理

选择成熟的桦褐孔菌，干燥并研磨成粉；桦褐孔菌粉不宜过细，否则溶剂流动困难，提取柱压增大；桦褐孔菌粉过粗会造成提取溶剂浸润困难，耗时较长不利于工业化应用。

2)原料浸泡

按桦褐孔菌粉与提取溶剂重量比为1：3.67的比例将桦褐孔菌粉加入提取溶剂中，室温下浸泡1h至桦褐孔菌粉充分吸胀；如果材料前期未完全干燥，可根据材料含水量调整至上述料液比。

3)装柱

将充分吸胀的桦褐孔菌与提取溶剂一起转入层析柱中，于25℃温度下，用柱层析洗脱的方法将多糖从层析柱内的桦褐孔菌中洗脱出来；为达到高效率提取的目的，洗脱过程必须严格按照柱层析中物质洗脱的方法；

4)循环柱层析提取

层析柱内流出的洗脱液以1个柱体积为单位收集，第1根层析柱的提取液上AB-8大孔树脂柱吸附后流出的平液可直接用于第2根层析柱的提取，依次类推；大规模连续生产时，用3根或更多层析柱组合成一条连续自动的生产线，可以不间断收取提取液进入下一道大孔树脂分离工序。经检测经过循环柱层析提取，桦褐孔菌多糖提取率可达80％。

5)大孔树脂的预处理

AB-8大孔树脂依次用95％的酒精、0.1mol/L盐酸、0.1mol/LNaOH分别浸泡12小时后装入层析柱至层析柱中树脂的高度为柱直径的10～15倍，蒸馏水以1.5BV/小时的流速充分洗涤5BV；

6)大孔树脂柱层析纯化

将循环柱层析提取的提取液以1.5BV/小时的流速加入预处理后的大孔树脂层析柱中，加提取液体积以不超过大孔树脂柱体积的4.5倍量为佳，加样时柱大孔树脂柱内不得产生气泡、断层；加提取液后柱上吸附12小时；

7)蒸馏水洗脱