[发明专利]一种高效提取、纯化桦褐孔菌多糖的方法

权利要求书

1.一种高效提取、纯化桦褐孔菌多糖的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)原料预处理

选择成熟的桦褐孔菌，干燥并研磨成粉；

2)原料浸泡

按桦褐孔菌粉与提取溶剂重量比为1：3.67的比例将桦褐孔菌粉加入提取溶剂中，室温下浸泡1h至桦褐孔菌粉充分吸胀；

3)装柱

将充分吸胀的桦褐孔菌与提取溶剂一起转入层析柱中，于25℃温度下，用柱层析洗脱的方法将多糖从层析柱内的桦褐孔菌中洗脱出来；

4)循环柱层析提取

层析柱内流出的洗脱液以1个柱体积为单位收集，第1根层析柱的提取液上AB-8大孔树脂柱吸附后流出的平液可直接用于第2根层析柱的提取，依次类推；

5)大孔树脂的预处理

AB-8大孔树脂依次用95％的酒精、0.1mol/L盐酸、0.1mol/L NaOH分别浸泡12小时后装入层析柱至层析柱中树脂的高度为柱直径的10～15倍，蒸馏水以1.5BV/小时的流速充分洗涤5BV；

6)大孔树脂柱层析纯化

将循环柱层析提取的提取液以1.5BV/小时的流速加入预处理后的大孔树脂层析柱中，加提取液体积以不超过大孔树脂柱体积的4.5倍量为佳，加样时柱大孔树脂柱内不得产生气泡、断层；加提取液后柱上吸附12小时；

7)蒸馏水洗脱

待多糖完全吸附后，用蒸馏水以2BV/小时流速洗涤树脂柱5BV，洗脱过程中，多糖以暗红色条带向下移动，可作为层析洗脱时的目测指标；

8)减压浓缩

洗脱液60℃减压浓缩至除去部分水；

9)干燥

减压浓缩后的浓缩液在-20℃预冷2小时后，再经-80℃真空冷冻干燥12小时得褐色粉末；或者将减压浓缩后的浓缩液以进风口温度为145℃，进料流速10mL/分钟的条件喷雾干燥得褐色粉末；

所述提取溶剂为使用氢氧化钠调整pH为13的蒸馏水；

所述循环柱层析提取用3根及以上层析柱组合成一条连续自动提取、纯化线。

2.根据权利要求1所述的高效提取、纯化桦褐孔菌多糖的方法，其特征在于：所述层析柱中充分吸胀的桦褐孔菌高度材料应为柱直径的5倍，洗脱流速为1BV/小时，柱内液面必须始终高于充分吸胀的桦褐孔菌材料。