[发明专利]一种抗菌蛋白及其编码基因和分离纯化方法有效
| 申请号： | 201910379136.0 | 申请日： | 2019-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN110028561B | 公开（公告）日： | 2021-04-09 |
| 发明（设计）人： | 张宝俊;郭洁心;马超;任璐;孙卓楠;常国蓉 | 申请（专利权）人： | 山西农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/32 | 分类号： | C07K14/32;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/16;C12N15/31;C12P21/02;A01N47/44;A01P3/00;C12R1/07 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 潘颖;赵青朵 |
| 地址： | 030800 山西*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 抗菌 蛋白 及其 编码 基因 分离 纯化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示蛋白的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：将解淀粉芽孢杆菌GZ-5菌株发酵液采用硫酸铵进行盐析，得到蛋白粗提物；
步骤2：将所述蛋白粗提物采用Tris-HCl缓冲液溶解，利用DEAE Sepharose FF离子交换层析柱将所得蛋白粗提物溶液进行线性梯度洗脱，回收第三个洗脱峰的洗脱液，经浓缩得到浓缩液；
步骤3：将所述浓缩液采用Sephadex G-100层析柱进行洗脱，回收第一个洗脱峰的洗脱液；
所述硫酸铵的饱和度为80％；
所述线性梯度洗脱的洗脱液为20mmoL/L Tris-HCl缓冲液和0～1.5moL/L NaC1；
步骤2中所述溶解所需的Tris-HCl缓冲液的浓度为20mmol/L，pH为7.6；
步骤3中所述洗脱所需的洗脱液为20mmoL/L Tris-HCl缓冲液；
步骤3中所述洗脱的流速为1.4～1.6mL/min。
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