[发明专利]响应面优化薏米多酚提取方法

权利要求书

1.响应面优化薏米多酚提取方法，其特征是：包括以下步骤，并且以下步骤顺次进行，

步骤一、制备薏米粉

将薏米用蒸馏水冲洗除去杂质，干燥、粉碎、过筛，制得薏米粉，放于干燥瓶中密封保存备用；

步骤二、制备薏米多酚提取液

选取甲醇溶液为薏米多酚提取液，按照设定的料液比混合薏米粉和甲醇溶液，置于超声波中超声提取后，置于离心机中离心，取上清液，挥干溶剂，用纯水洗涤定容到设定的体积，测定薏米多酚提取率并获得薏米多酚提取率最大条件下对应的各单一因素值；所述薏米多酚提取率的测定方法为：

①称取0.0100g没食子酸置于10mL容量瓶中，加入纯水溶解并定容，获得浓度为1mg/mL没食子酸标准储备液，

②取0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL标准储备液分别放入50mL容量瓶，用纯水定容，得到10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL的标准系列溶液，

③用吸量管分别吸取标准系列溶液1mL于比色管中，依次加入1mL福林酚试剂、3.00mL7.5％无水碳酸钠溶液，摇匀后避光反应60min，同时做试剂空白，作为参比溶液，在765nm处测量吸光度，

④以没食子酸浓度为横坐标C，吸光度值为纵坐标A，得到回归方程A＝0.0128C+0.0154，相关系数为0.999；

⑤吸取1mL薏米多酚提取液置于比色管中，依次加入1mL福林酚试剂、3.00mL7.5％无水碳酸钠溶液，摇匀后避光反应60min，在765nm处测量吸光度值A，根据步骤④中的回归方程获得薏米中所含多酚浓度C；

⑥根据多酚提取率w公式：w＝(C×V)/m，获得多酚提取率w，其中V为样品定容体积，m为称样质量，C为样品中多酚浓度；

步骤三、选择料液比、甲醇体积分数、提取温度和提取时间四个因素为自变量，以步骤二中获得的料液比、甲醇体积分数、提取温度和提取时间的单一因素值为中间值进行自变量取值，选择多酚提取率为响应值，进行响应面法优化，获得薏米多酚提取率Y的回归方程：

Y＝76.54+1.53A+0.98B-2.10C+1.42D-0.55AB+2.12AC-2.77AD-1.63BC-

2.67BD+0.000CD-3.49A²-1.89B²-11.14C²-1.94D²，

其中A为料液比、B为甲醇体积分数、C为提取温度、D为提取时间；

步骤四、通过软件Design-Expert8.0.5.0优化并获得在料液比、甲醇体积分数、提取温度和提取时间四个因素交互作用下的薏米多酚提取率最大值及对应的料液比值、甲醇体积分数值、提取温度值和提取时间值，其中，薏米多酚提取率最大值为76.93mg/100g，料液比值为1:21.1、甲醇体积分数值为63.2％、提取温度值为54℃、提取时间值33.6min。

2.根据权利要求1所述的响应面优化薏米多酚提取方法，其特征是：所述步骤一中干燥条件为置于恒温鼓风干燥箱105℃干燥2h。

3.根据权利要求1所述的响应面优化薏米多酚提取方法，其特征是：所述步骤一中过筛为过20目筛。

4.根据权利要求1所述的响应面优化薏米多酚提取方法，其特征是：所述步骤二中单一因素包括甲醇溶液的体积分数、薏米粉与甲醇溶液的料液比、提取温度、提取时间和提取次数。

5.根据权利要求4所述的响应面优化薏米多酚提取方法，其特征是：所述甲醇溶液的体积分数为40％～80％，薏米粉与甲醇溶液的料液比为1:10～1:50，提取温度为35℃～75℃，提取时间为10min～50min，提取次数为1次～6次。