[发明专利]一种Pt@MOF-GO标记的电化学传感器的制备方法及应用

说明书

本发明涉及一种Pt@MOF‑GO标记的电化学传感器的制备方法及应用，属于免疫分析和生物传感技术领域。本发明使用Au NPs作为基底材料，同时利用MOF‑GO复合材料负载Pt纳米粒子与检测抗体孵化作为信号标记以增强电化学传感器的催化性能，成功制备了Pt@MOF‑GO标记的电化学传感器，实现了对肿瘤标志物AFP、PSA的定量灵敏检测，具备检测限低，灵敏度高，重复性、选择性和稳定性好等优势，具有重要的科学意义和应用价值。

技术领域

本发明属于免疫分析、纳米材料和生物传感技术领域，提供了一种Pt@MOF-GO标记的电化学传感器的制备方法及应用。具体是采用Pt@MOF-GO为检测抗体标记物，实现了对肿瘤标志物AFP、PSA的灵敏检测。

背景技术

在近些年中，随着生活水平的提高，随之而来的污染也在加剧，这导致肿瘤的发病率越来越高。肿瘤是从正常的细胞转化而来的异质增生细胞，可在人体的多个器官和组织出现，在早期的时候不易被人们察觉，由于肿瘤的生长和转移速度极快，当人们察觉时往往为时已晚，这严重损害人们的健康并且危及生命。开发一种灵敏检测相关生物标志物对许多的生物医学和诊断研究方面至关重要。目前来说，肿瘤标志物检测的方法有很多种，如酶联免疫吸附剂测定，荧光免疫分析，放射免疫法等，除了这些技术，电化学免疫传感器由于其灵敏性高、检测限低、检测速度快、操作简便而受到了广泛的关注。

电化学免疫传感器是将免疫分析技术和生物传感技术相结合，用于测量电流、电位的变化来进行分析的。电化学免疫传感器是抗原抗体特异性结合所引起的电化学信号变化反映的，一般分为有标记型电化学免疫传感器和无标记型电化学免疫传感器。有标记型电化学免疫传感器具有灵敏度高、检测限低、特异性高等优点，已广泛应用于多种领域。

Au NPs作为基底材料，不仅制备方法简便，而且是一种生物亲和性材料，可以结合更多的抗体，同时Au NPs导电性非常好，可以加快电子的转移和传输。Pt@MOF-GO作为检测抗体标记物，可以增加免疫反应传感器的灵敏度，并提高其催化性能。MOF-GO复合材料不仅具有极大的比表面积，为反应提供足够多的活性位点，而且良好的导电性和催化性能。Pt纳米粒子具有良好的催化性能，可以进一步提高电化学免疫传感器的灵敏度。本发明采用AuNPs作为基地材料，Pt@MOF-GO作为检测抗体标记物构建的标记型电化学免疫传感器，实现了对肿瘤标志物AFP的检测，具有检测限低，灵敏度高，重复性、选择性和稳定性好等优点，在临床应用中实现了对肿瘤标志物的精确检测。

发明内容

本发明提供了一种Pt@MOF-GO标记的电化学传感器的制备方法及应用，实现了对肿瘤标志物的灵敏检测。

本发明的目的之一是提供一种Pt@MOF-GO标记的电化学传感器的制备方法。

本发明的目的之二是将所制备的Pt@MOF-GO标记的电化学传感器应用于肿瘤标志物的高灵敏、特异性检测。

本发明的技术方案，包括以下步骤。

1. 一种Pt@MOF-GO标记的电化学传感器的制备方法，步骤如下：

（1）将直径4 mm的玻碳电极用Al₂O₃抛光粉打磨成镜面，超纯水清洗干净；

（2）将6 µL、1 ~ 3 mg/mL的Au NPs溶液滴涂于上述电极表面，室温下晾干，超纯水洗电极表面，晾干；

（3）继续将6 µL、8 ~ 12 µg/mL的肿瘤标志物捕获抗体Ab₁滴加到电极表面，超纯水冲洗，4 ℃冰箱干燥；

（4）继续将3 µL、0.5 ~ 1.5 mg/mL、质量分数为1 %的牛血清蛋白溶液滴加到电极表面，用以封装电极表面的非特异性活性位点，超纯水冲洗电极表面，除去未结合的BSA，4℃冰箱晾干；