[发明专利]珍珠贝美白因子、其制备方法及用途

说明书

本发明公开了一种珍珠贝美白因子的制备方法，其包括如下步骤：步骤1)将蚌壳粉碎后，过筛，获得小颗粒蚌壳粉；步骤2)将蚌壳粉与弱酸水溶液混合后，搅拌分解，分离出固体为粗蛋白；步骤3)将粗蛋白用去离子水清洗干净，再与pH值6.0‑7.5缓冲溶液混合，将混合液通过超高压100‑200Mpa、40～80℃处理20～40min后，再在超声条件下、在40‑60℃下与蛋白酶混合反应2‑7h；步骤4)在85‑100℃下搅拌20‑50min灭酶后，通过过滤膜压滤获取无菌过滤液；步骤5)冻干保护剂与过滤液混合，在预冻后放入真空冷冻干燥仓中进行冻干12‑20h；最终收获水分含量在2‑5％的冻干粉。本发明还公开了所述方法得到的种珍珠贝美白因子在制备内皮素拮抗剂中的用途。本发明工艺简单，得到的产品美白效果明显。

技术领域

本申请涉及一种珍珠贝美白因子及其制备方法、以及该珍珠贝美白因子的用途，尤其涉及一种珍珠贝美白因子的冻干粉及其制备方式、以及该珍珠贝美白因子对内皮素的拮抗作用。

背景技术

美白是亚洲人最为关心的护肤需求，针对肌肤美白功效机理的研究，其中抑制内皮素刺激细胞分泌黑色素和抑制酪氨酸酶活性是美白作用中两个关键环节。因此国内外很多研究单位开展内皮素拮抗剂的寻找工作，例如专利(申请号：200610030123.5，发明名称：具内皮素拮抗作用的天然蛋白的酶介混合肽)列举了很多相关蛋白多肽的制备。但该专利忽略了很多低值硬蛋白产物，尤其是目前产量很大的三角帆蚌的蚌壳。该蚌壳与珍珠存在明显区别，为此已有国家标准为鉴别珍珠粉和蚌壳粉提供近红外鉴别的方法，另外在中药中两个功效就存在很多的区别。蚌壳的研究，国内外主要鲜有报道，即有报道也主要集中三角帆蚌净化水质的研究。自去年发现烧制后的蚌壳粉具备超强吸附重金属的作用后，我们对蚌壳的研究也日益开始重视，因此开始探索三角帆蚌中的成分，试探其是否具备美白作用，以及作用机理如何。

这项工作目的在于提升蚌壳的附加值，开拓其在护肤品保健品中的应用领域。在已有珍珠复合美白因子专利申请的基础上，我们对其制备方法再提出创新，在基于机械化学的基础上，保留部分蚌壳中的钙质，并且将蚌壳中的蛋白进行选择性的酶切，在计划的酶解度后进行冻干干燥，获取得到具备内皮素拮抗作用的美白冻干粉。该技术克服了珍珠蛋白水解液不稳定、活性成分分子量要求严格以及优化钙离子与活性多肽的比例的探索工作。而这些都是现有技术中未考虑也未克服的问题。而且该美白效果明显，符合期望，并且低廉的蚌壳粉能得到显著的附加值，广泛应用于美白护肤品和补钙的保健食品中。

发明内容

本申请所要解决的问题是如何通过低廉大量副产物就能生产出具备内皮素抑制的产品。具体有：第一，预处理：如何处理蚌壳中的钙质，如何处理蚌壳粉的粉末粒径；第二、如何提高蚌壳半成品酶解的速率；第三、如何确定酶的种类和酶解度。第四、如何模拟皮肤黑色素生成的模型以及美白机理的研究。

基于以上这些问题，本发明的发明点在于：1.保留蚌壳中的部分钙质，有利于提高皮肤钙离子通道，有利于蚌壳多肽越过皮肤屏障，作用于黑色素细胞膜。2.本发明的发明人研究中发现，并不用进行酶解到2000Da以下的多肽才具备内皮素抑制作用，这将大大提高了利用率，而且利用三角帆蚌蚌壳这种低廉大量副产物就能生产出具备内皮素抑制的产品，这也是废弃物再利用的发现。3.基于机械化学法促进蚌壳蛋白空间结构的打开，促进蛋白酶的酶解；4、建立起3D内皮素黑色素细胞模型，科学模拟确定蚌壳多肽组分有利于内皮素的拮抗以及抑制黑色素的转移。

本提供了一种珍珠贝美白因子的制备方法，该方法包括如下步骤：

步骤1)将蚌壳粉碎后，过筛，获得小颗粒蚌壳粉；

步骤2)将蚌壳粉与质量分数为10-20％的弱酸水溶液按1:5-20的质量比混合后，在30-70℃下100-200rpm速度下搅拌，充分分解1-4小时，分离出固体为粗蛋白；