[发明专利]珍珠贝美白因子、其制备方法及用途

权利要求书

1.一种珍珠贝美白因子的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1)将蚌壳粉碎后，过筛，获得小颗粒蚌壳粉；

步骤2)将蚌壳粉与质量分数为10-20％的弱酸水溶液按1:5-20的质量比混合后，在30-70℃下100-200rpm速度下搅拌，充分分解1-4小时，分离出固体为粗蛋白；

步骤3)将粗蛋白用去离子水清洗干净到清洗液中TDS值在100-500ppm时，再与pH值6.0-7.5缓冲溶液混合，粗蛋白与缓冲溶液的质量比为1:5-15，将混合液通过超高压100-200Mpa、40～80℃处理20～40min后，再在超声条件下、在40-60℃下与蛋白酶混合反应2-7h；

步骤4)在85-100℃下搅拌20-50min灭酶后，通过过滤膜压滤获取无菌过滤液；

步骤5)冻干保护剂与过滤液按照质量体积比0.5～4：100g/mL的比例混合，在液氮或者-70～-85℃条件下进行预冻，随后放入真空冷冻干燥仓中进行冻干12-20h；最终收获水分含量在2-5％的冻干粉。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2)所述弱酸选自醋酸、乳酸、柠檬酸、碳酸、苹果酸中的一种或者多种。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3)所述的pH值6.0-7.5缓冲溶液为PBS，Tris-HCl或柠檬酸缓冲液。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3)所述的蛋白酶为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶或、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、胃蛋白酶中的一种或多种。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3)所述蛋白酶与混合液的质量体积比为1:100-1:10g/mL。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤4)所述过滤膜为0.22μm的过滤膜。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤5)所述的冻干保护剂为蔗糖、葡萄糖、谷氨酸、白蛋白、壳聚糖中的一种或多种。

8.一种珍珠贝美白因子，其由权利要求1-7中任一项所述方法制备得到。

9.权利要求8所述珍珠贝美白因子在制备内皮素拮抗剂中的用途。