[发明专利]一种NPC培养基、外泌体的制备方法和应用

权利要求书

1.一种神经始祖细胞培养基，其特征在于，包括以下组分：DMEM/F12培养基，人转铁蛋白，重组人胰岛素，孕酮，皮质脂酮，T3(triodo-I-thyronine)，谷胱甘肽，过氧化氢酶，超氧化物歧化酶，乙酸维生素E，生育酚，亚油酸，硫辛酸，亚麻酸，左旋肉碱盐酸盐，腐胺，乙醇胺盐酸盐，亚硒酸钠，D-半乳糖，乳酸，丙酮酸钠，谷氨酰胺，维生素H，脂化牛血清白蛋白，抗坏血酸维生素C，氯化钠，dorsomorphin，碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基以1L计算，包括以下组分：

3.一种制备外泌体的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)提供诱导多能干细胞，然后采用权利要求1或2的神经始祖细胞培养基诱导分化为神经干细胞，得到含有神经干细胞和外泌体的培养基；

(2)收集步骤(1)所得培养基进行纯化即得所述外泌体。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中纯化包括如下步骤：步骤(1)所得培养基用0.22um无菌过滤器过滤，过滤的培养基离心，然后将上清转移到试管中，在10000×g中离心并将上清收集到另一个试管中，然后将上清分装，使用Sorvll T880固定角转子100000×g高速离心，离心后将上清液移除，并用PBS将颗粒状材料悬浮、转移到一个Untrocrimp管，再经100000×g离心，再次将上清移除，并用100ul PBS将颗粒状材料悬浮，直径30～110纳米的悬浮颗粒状材料即为纯化后的外泌体。

5.采用权利要求3或4的方法制备的外泌体。

6.权利要求5所述的外泌体在制备治疗神经退行性疾病的药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述神经退行性疾病为阿尔兹海默症或帕金森症。

8.一种治疗神经退行性疾病的药物，其特征在于，所述药物中含有权利要求5所述的外泌体。