[发明专利]靶向酪氨酸激酶识别的可逆性荧光化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明提供靶向酪氨酸激酶识别的可逆性荧光化合物及其制备方法和应用。具体地，本发明提供一类具有荧光淬灭现象的新结构化合物，该化合物由c‑Met抑制剂与BODIPY染料通过脂肪链连接组成。本发明还提供上述化合物的制备方法及其在制备治疗和/或诊断肿瘤的药物中的应用，所述药物通过对肿瘤细胞中c‑Met蛋白激酶活性可视化实现对肿瘤的治疗和/或诊断作用。

技术领域

本发明涉及一类靶向酪氨酸激酶c-MET识别的可逆性荧光化合物及其制备方法和用途。

背景技术

癌症是威胁人类健康的重要杀手，肿瘤个体化治疗体系的核心和成功的关键在于寻找并确定个体肿瘤所依赖的驱动型癌基因，通过开发针对药物敏感预测标志物的特异性探针，可遴选出携带驱动基因表型的敏感病人进行靶向治疗。这一基于特定分子分型的个体化治疗模式是肿瘤靶向治疗的主流，在癌症诊疗中具有巨大价值。

在抗肿瘤药物靶标研究中，蛋白激酶高达75％；绝大多数已上市的小分子肿瘤靶向抑制剂均为酪氨酸蛋白激酶抑制剂(Tyrosine Kinase Inhibitor，TKI)。c-Met也是受体型酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase，RTK)家族的一员，其天然配体为肝细胞生长因子(HGF，hepatocyte growth factor)，共同形成HGF/c-Met信号通路。[Cancer lett.,2012,319(1):109-117.]c-Met信号通路不但在胚胎正常发育、伤口愈合、肝脏再生中具有重要作用，而且在病理状态下，c-Met的过度表达或过度激活具有诱导肿瘤细胞增殖、转移及肿瘤血管生成的作用。在许多实体瘤(肺癌、恶性胶质瘤、卵巢癌、胃癌、结直肠癌、肾癌等)中，该通路多通过MET基因的扩增，引起c-Met蛋白的高表达和激酶活性的增加。[Nat.Rev.Mol.Cell Biol.,2003,4:915-925.]大量的临床数据提示c-Met的表达量与预后、转移性和耐药性紧密相关，因此针对c-Met靶点的肿瘤分子靶向诊断和治疗具有重要意义。

目前已上市和临床在研的代表性c-Met抑制剂有如下所示：

近年来，以c-Met为靶点的小分子靶向药物研究广泛，发展迅速。多个选择性c-Met激酶抑制剂已在临床测试的不同阶段，比如tivantinib(ARQ 197)[Mol CancerTher.2010,9(6):1544-53.],Tepotinib、AMG337、JNJ-38877618和SGX523[Mol CancerTher,2009,8(12),3181-3190.]等。此外，非选择性c-Met激酶抑制剂如crizotinib与cabozantinib已被FDA批准，分别适用于ALK重组的非小细胞肺癌和转移性甲状腺髓样癌。但不加筛选的患者在接受c-Met激酶抑制剂的靶向治疗中总体有效率偏低。[GeneChromosone Canc.,2008,47(12):1025-1037.]“肿瘤异质性”(Tumor Heterogeneity)现象在MET基因的突变和扩增上得到了充分体现。在胃癌病患中，MET基因的扩增率为16-30％；而在遗传性肾乳头状细胞癌病患中，MET基因点突变的发生率为100％。如何针对敏感预测标志物c-Met筛选出适合c-Met激酶抑制剂治疗的病患人群，实现病患的精确分子分型，是靶向治疗获取成功的关键。

目前检测c-Met在活检或手术样本中异常活化状况的手段包括：(1)通过免疫组化或Western blotting的方法检查c-Met的表达水平；(2)利用荧光原位杂交方法检测MET基因的拷贝数；(3)DNA测序来探测MET基因的点突变状况。但是这些方法检测费用高、耗时长、操作复杂，在肿瘤病患的分子分型中无法广泛开展。因此，亟需开发简单、便捷、准确检测c-Met表达量的方法用于肿瘤的初步筛查。

小分子化合物的荧光成像具有成本低、选择性好、灵敏度高、响应速度快、操作简单便捷等优点，在药物高通量筛选、细胞成像、靶标定位及疾病诊断等方面已有大量的应用。

发明内容