[发明专利]一种纳米凝胶、其制备方法和抗肿瘤载药纳米凝胶

权利要求书

1.一种纳米凝胶，其特征在于，具有式(Ⅰ)所示结构：

其中，m、x、y、n为聚合度，40≤m≤120，1≤x≤50，1≤y≤50，1≤n≤50；

CPPs为末端为半胱 氨酸的细胞膜穿透肽修饰基；

所述末端为半胱 氨酸的细胞膜穿透肽选自R₉、MLT、TAT、Arg7、VP22、MAP、Pep-1、P22N或DPV3。

2.一种权利要求1所述的纳米凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a)在引发剂的作用下，将氨基化烯丙基聚乙二醇与2-(Boc-氨基)乙硫醇在第一有机溶剂中反应，形成叔丁氧羰基-聚乙二醇-氨基化合物；

b)将所述叔丁氧羰基-聚乙二醇-氨基化合物与L-胱氨酸-N-环内酸酐及L-苯丙氨酸-N-环内酸酐在第二有机溶剂中反应，形成叔丁氧羰基-亚胺基-聚乙二醇-聚(L-苯丙氨酸-co-L-胱氨酸)；

c)在酸性条件下，将所述叔丁氧羰基-亚胺基-聚乙二醇-聚(L-苯丙氨酸-co-L-胱氨酸)在第三有机溶剂中进行脱除叔丁氧羰基的反应，形成式(Ⅶ)化合物；

d)将所述式(Ⅶ)化合物溶解于第四有机溶剂中，与3-马来酰亚胺基丙酸的水溶液混合反应，形成式(Ⅷ)化合物；

e)将所述式(Ⅷ)化合物与末端为半光氨酸的细胞膜穿透肽在第五有机溶剂中反应，形成式(Ⅰ)所示的纳米凝胶；

其中，m、x、y、n为聚合度，40≤m≤120，1≤x≤50，1≤y≤50，1≤n≤50；

CPPs为末端为半胱 氨酸的细胞膜穿透肽修饰基。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a)中：

所述氨基化烯丙基聚乙二醇与2-(Boc-氨基)乙硫醇的摩尔比为1：(5～50)；

所述引发剂包括偶氮二异丁腈和/或苯偶酰双甲醚；

所述引发剂与氨基化烯丙基聚乙二醇的摩尔比为1∶(1～10)；

所述反应的温度为15～50℃；

所述反应的时间为2～7天。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中：

所述L-胱氨酸-N-环内酸酐与步骤a)中氨基化烯丙基聚乙二醇的摩尔比为(5～20)∶1；

所述L-苯丙氨酸-N-环内酸酐步骤a)中氨基化烯丙基聚乙二醇的摩尔比为(5～20)∶1；

所述反应的温度为15～50℃；

所述反应的时间为2～7天。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤c)中：

所述酸性条件由溴化氢溶于酸液中形成的酸性溶液提供；所述溴化氢与酸液的体积比为(0.5～5)：1；

所述第三有机溶剂为含氟乙酸，或为含氟乙酸与二氯甲烷的混合物；所述含氟乙酸为三氟乙酸和/或二氟乙酸；

所述酸性溶液与第三有机溶剂的体积比为(1～3)：(10～20)；

所述反应的温度为20～50℃；

所述反应的时间为0.5～4h。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤d)中：

所述式(Ⅶ)化合物与3-马来酰亚胺基丙酸的摩尔比为1：(5～50)；

所述反应的温度为15～50℃；

所述反应的时间为2～7天；

所述反应在缩合剂和稳定剂的作用下进行；

所述缩合剂包括1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、二环己基碳二亚胺和二异丙基碳二亚胺中的一种或几种；

所述稳定剂包括N-羟基琥珀酰亚胺和O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯中的一种或几种。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤e)中：

所述式(Ⅷ)化合物与细胞膜穿透肽的摩尔比为1：(2～20)；

所述反应的温度为15～50℃；

所述反应的时间为2～7天。