[发明专利]一种利用荧光各向异性技术检测赭曲霉毒素A的方法

权利要求书

1.一种检测赭曲霉毒素A的方法，包括如下步骤：将荧光染料标记的核酸适配体、链霉亲和素标记的单链DNA分子和待测样本共同反应，通过测定反应体系的荧光各向异性值实现对待测样本中赭曲霉毒素A的检测；

所述核酸适配体能够特异性结合赭曲霉毒素A；

所述单链DNA分子能够与所述核酸适配体的部分序列反向互补形成双链结构；当形成双链结构后，荧光染料和链霉亲和素位于双链结构的同一末端，两者在空间上邻近；

所述“荧光染料和链霉亲和素位于双链结构的同一端，两者在空间上邻近”是通过如下（a1）或（a2）所示的方式实现的：

（a1）当单链DNA分子与核酸适配体的自5’末端起部分序列反向互补时，所述荧光染料标记于核酸适配体的5’ 末端，所述链霉亲和素标记于单链DNA分子的3’ 末端；

（a2）当单链DNA分子与核酸适配体的自3’ 末端起部分序列反向互补时，所述荧光染料标记于核酸适配体的3’ 末端，所述链霉亲和素标记于单链DNA分子的5’ 末端。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述荧光染料为荧光素FAM。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

所述核酸适配体为序列表的序列1所示的单链DNA分子；

所述单链DNA分子为如下（b1）-（b8）中的任一种：

（b1）序列表的序列5所示的单链DNA分子；

（b2）序列表的序列2所示的单链DNA分子；

（b3）序列表的序列3所示的单链DNA分子；

（b4）序列表的序列4所示的单链DNA分子；

（b5）序列表的序列6所示的单链DNA分子；

（b6）序列表的序列7所示的单链DNA分子；

（b7）序列表的序列8所示的单链DNA分子；

（b8）序列表的序列9所示的单链DNA分子。

4.一种DNA分子组合，由荧光染料标记的核酸适配体和链霉亲和素标记的单链DNA分子组成；所述核酸适配体能够特异性结合赭曲霉毒素A；所述单链DNA分子能够与所述核酸适配体的部分序列反向互补形成双链结构；当形成双链结构后，荧光染料和链霉亲和素位于双链结构的同一末端，两者在空间上邻近；

所述“荧光染料和链霉亲和素位于双链结构的同一端，两者在空间上邻近”是通过如下（a1）或（a2）所示的方式实现的：

（a1）当单链DNA分子与核酸适配体的自5’末端起部分序列反向互补时，所述荧光染料标记于核酸适配体的5’ 末端，所述链霉亲和素标记于单链DNA分子的3’ 末端；

（a2）当单链DNA分子与核酸适配体的自3’ 末端起部分序列反向互补时，所述荧光染料标记于核酸适配体的3’ 末端，所述链霉亲和素标记于单链DNA分子的5’ 末端。

5.如权利要求4所述的DNA分子组合，其特征在于：所述荧光染料为荧光素FAM。

6.如权利要求4或5所述的DNA分子组合，其特征在于：

所述核酸适配体为序列表的序列1所示的单链DNA分子；

所述单链DNA分子为如下（b1）-（b8）中的任一种：

（b1）序列表的序列5所示的单链DNA分子；

（b2）序列表的序列2所示的单链DNA分子；

（b3）序列表的序列3所示的单链DNA分子；

（b4）序列表的序列4所示的单链DNA分子；

（b5）序列表的序列6所示的单链DNA分子；

（b6）序列表的序列7所示的单链DNA分子；

（b7）序列表的序列8所示的单链DNA分子；

（b8）序列表的序列9所示的单链DNA分子。

7.权利要求4至6任一所述的DNA分子组合的应用，为如下（c1）或（c2）：

（c1）检测赭曲霉毒素A；

（c2）制备用于检测赭曲霉毒素A的试剂盒。

8.含有权利要求4至6任一所述的DNA分子组合的试剂盒；所述试剂盒的用途为检测赭曲霉毒素A。