[发明专利]液质联用同时检测PKU、CAH和GAL的试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及一种液质联用同时检测PKU、CAH和GAL的试剂盒及其应用。本发明的试剂盒包括以下试剂：(a)校准品，所述校准品含有苯丙氨酸、17α‑羟孕酮和半乳糖标准品；(b)提取液，所述提取液为甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈中的至少一种；和(c)流动相，所述流动相由流动相A和流动相B组成，所述流动相A和流动相B由(Ⅰ)水、(Ⅱ)甲醇和(Ⅲ)甲酸或乙酸组成，或者，所述流动相A和流动相B由(Ⅰ)水、(Ⅳ)乙腈和(Ⅲ)甲酸或乙酸组成。采用本发明试剂盒检测PKU、CAH和GAL检验快速，检测结果准确且重复性高。

技术领域

本发明涉及一种试剂盒及其应用，具体涉及一种液质联用同时检测PKU、CAH和GAL的试剂盒及其应用。

背景技术

对新生儿进行疾病筛查是近代预防医学领域的一项重要进展,是提高人口素质的重要措施。通过新生儿疾病筛查,可以在患儿未有临床疾病表现时就能做出早期诊断,进行早期治疗,以避免患儿重要器官出现不可逆的损害,保障儿童体格和智能的正常发育。

苯丙酮尿症为常染色体隐性遗传病，病儿为苯丙氨酸羟化酶(一种特殊肝酶)的先天缺乏或活性降低，致苯丙氨酸不能正常羟化成酪氨酸，进入人体循环，因而血液和脑脊液中苯丙氨酸浓度也随之增加，并从尿中排出苯丙酮酸。酪氨酸酶也受到抑制，致酪氨酸代谢障碍，黑色素形成减少，因而肤色浅白，毛发淡黄，虹膜色淡。由于汗液和尿液排出苯乙酸，故小儿有特殊霉味或鼠味。由于苯丙氨酸、苯丙酮酸、苯乙酸的蓄积，使脑发育障碍，髓鞘形成受阻，灰、白质变性，致婴儿早期即发生智力低下。病儿苯丙氨酸增高后，5-羟色胺、γ氨基丁酸减少，致一岁前常发生癫痫发作，重者有类似婴儿痉挛症的临床表现和脑电图出现高峰失律。病儿还可有运动障碍，脑性瘫痪，多动，震颤以及呕吐、不安、湿疹等表现。如果早期予以低苯丙氨酸饮食治疗,使患儿血液中的苯丙氨酸维持在理想范围[60～120μmol/L(1～2mg/dL),可防止智力严重障碍以及继发癫痫等疾病的发生。因此PKU的新生儿筛查是早期发现患儿并及时予以治疗的关键所在。

苯丙酮尿症(phenylketonuria，PKU)是由于苯丙氨酸代谢途径中酶缺陷所致，因患儿尿液中排出大量苯丙酮酸等代谢产物而得名。PKU是氨基酸代谢障碍中较常见的一种，属常染色体隐性遗传。其发病率随种族而异，约为l/6000～l/25000，我国发病率约为1/16500，呈出明显南少北多的差异。

近年发现，经过治疗，智力发育正常并同正常男性结婚的女性PKU病人，如果妊娠期间不合理地控制饮食、流产、死产、宫内发育不全等发生率很高，即使其婴儿不患PKU，也多有智力低下，头小畸形、先天性心脏病等合并症，这是因为母体高浓度的苯丙氨酸可通过胎盘使胎儿受到损害。这类婴儿被称为母性PKU患儿。为此，生育期内的PKU女性患者应有计划地控制饮食，最好在妊娠前半年开始直至分娩，让血苯丙氨酸浓度控制在2～6mg/dL，使胎儿免受损伤。

17α-羟孕酮由肾上腺皮质及性腺产生，其孕酮活性很低。17α-羟孕酮经21-羟化酶作用，生成皮质醇的前体化合物S(CpS)。21-羟化酶缺乏的遗传性肾上腺皮质增生患者血清中17α-羟孕酮浓度明显升高，11-羟化酶缺乏时17α-羟孕酮上升幅度较小。约6％的成年多毛女性有不同程度的21-羟化酶缺乏。17α-羟孕酮的测定也用于分析男性和女性的普通痤疮、男性秃顶及一些不明原因的不育症。

遗传性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)又称肾上腺生殖器综合征或肾上腺性变态征。主要由于肾上腺皮质激素生物合成过程中所必需的酶存在缺陷，致使皮质激素合成不正常。多数病例肾上腺分泌理糖激素、理盐激素不足而雄性激素过多，故临床上出现不同程度的肾上腺皮质功能减退，伴有女孩男性化，而男孩则表现性早熟，此外尚可有低血钠或高血压等多种症候群。