[发明专利]一株解淀粉芽胞杆菌生防功能基因序列及其应用

权利要求书

1.一株解淀粉芽胞杆菌Bs-18的生防功能基因序列，如SEQ ID NO.1所示，其所对应的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一种用于解淀粉芽胞杆菌Bs-18的生防功能基因序列构建的特异性引物，其特征在于：

T4-7 Fwd GGCGGATCCGTCCGTTTCATAAGTTGACAAGACG SEQ ID NO.3；

T4-7Rev GCCGAATTCCAAAGGAAGTGGCAGCGAATG SEQ ID NO.4。

3.一株用于构建解淀粉芽胞杆菌Bs-18的生防功能突变体，菌株命名为T4-7，其特征在于该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏登记号为：CGMCCNo.17316；保藏时间为：2019年3月8日。

4.一种采用权利要求3所述的用于构建解淀粉芽胞杆菌Bs-18的生防功能突变体T4-7进行构建的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

（1）突变体T4-7插入基因的测序：通过反向PCR法获得T4-7被转座子TnYLB-1随机插入的插入片段序列；

（2）插入基因的PMK4穿梭质粒表达载体的构建：应用限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切T4-7的插入基因全序列和质粒PMK4，再将酶切片段连接构建重组载体；将构建的重组载体转化大肠杆菌，挑取正确的转化子进行测序，所测序列与插入基因序列、质粒PMK4进行BLAST比对分析，同源性100%说明构建的穿梭质粒表达载体构建成功；

（3）突变体插入基因功能的恢复：将构建的重组表达载体电击转化突变体T4-7；

（4）大田防治试验验证此基因的生防功能：通过防治黄瓜白粉病试验，结果表明突变体恢复株的生防效果高于突变株T4-7。

5.权利要求1所述的解淀粉芽胞杆菌Bs-18的生防功能基因序列在防治黄瓜白粉病方面的应用。

6.权利要求3所述的突变株T4-7为解淀粉芽孢杆菌Bs-18被TnYLB-1转座子随机插入的突变株。