[发明专利]一种白细胞分类试剂及方法

说明书

本发明涉及血液分析技术领域，特别涉及一种白细胞分类试剂及方法。以重量份计，该白细胞分类试剂包括两性离子表面活性剂0.1～5份、非离子表面活性剂0.5～10份、助溶剂0.1～30份、渗透压调节剂5～30份、防腐剂0.1～2份、缓冲剂5～20份、染料0.001～0.2份、固定剂0.1～2份。本发明白细胞分类试剂能对正常血样进行四分群(中性粒细胞和嗜碱性细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞相对性的4个集团)的同时，还能对含有幼稚白细胞的特定疾病的患者的血液试样进行检测，可分为中性粒细胞和嗜碱性细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞相对性的4个集团，以及幼稚白细胞相对应的1个集团共5个集团。

技术领域

本发明涉及血液分析技术领域，特别涉及一种白细胞分类试剂及方法。

背景技术

对于正常的健康人，后骨髓细胞以前的幼稚白细胞不会出现在外周血中，杆状核细胞也少。但在特殊情况下，如得了白血病等血液病、骨髓癌转移、重症感染时，往往就会出现幼稚白细胞。因此测定幼稚白细胞对于诊断疾病具有极其重要的意义。

中国专利CN1095481A公开了对幼稚白细胞分类计数的方法，该专利采用含有非离子表面活性剂和氨基酸的溶血剂，液体的pH值为5.0-9.0、渗透压为150-600mOsm/kg、电导率为6.0-9.0mS/cm的缓冲液。经过溶血剂处理，能使血样中的早幼白细胞保持生存状态而使其他白细胞损伤，通过荧光染料对上述白细胞进行染色，可对早幼白细胞和白细胞进行分类计数。该方法的局限性在于对其他成熟白细胞损伤过大，只能将白细胞分为淋巴、单核和粒细胞三类，无法对白细胞进行五分类。

中国专利CN101008641B提供了一种幼稚白细胞分析用试剂及其试剂盒，包含了破坏试样中红细胞及成熟白细胞细胞膜的表面活性剂、收缩受损血细胞的增溶剂、糖和对核酸染色的色素。其能够精确地分析原始粒细胞和幼稚粒细胞等幼稚白细胞和成熟白细胞，且试样的处理条件的允许范围宽于以往。

中国专利CN101680879B公开了一种幼稚白细胞分析用试剂及试剂盒。其包含损伤红细胞及成熟白细胞的细胞膜的表面活性剂、使受损血细胞收缩的助溶剂及核酸染色色素，并且渗透压在10mOsm/kg至150mOsm/kg范围之间，可以更明确地区分原粒细胞和溶血的红细胞，并对幼稚白细胞和成熟白细胞进行准确的分类及计数。

但以上这些能够检测幼稚白细胞的试剂或试剂盒都需要荧光染料对细胞核酸染色，试剂配方难度大，使用成本高，长期依赖进口，购买渠道繁琐等，无法及时满足中小医院的正常使用，而且需要在特定能够检测荧光信号的血液分析仪上使用，具有相当程度上的局限性。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种白细胞分类试剂及方法。该试剂能对正常血样进行四分群(中性粒细胞和嗜碱性细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞相对性的4个集团)的同时，还能对含有幼稚白细胞的特定疾病的患者的血液试样进行检测，可分为中性粒细胞和嗜碱性细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞相对性的4个集团，以及幼稚白细胞相对应的1个集团共5个集团。

试剂及方法为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种白细胞分类试剂，以重量份计，包括两性离子表面活性剂0.1～5份、非离子表面活性剂0.5～10份、助溶剂0.1～30份、渗透压调节剂5～30份、防腐剂0.1～2份、缓冲剂5～20份、染料0.001～0.2份、固定剂0.1～2份。

作为优选，两性离子表面活性剂选自月桂酰胺丙基甜菜碱、椰油酰胺丙基甜菜碱、油酸酰胺丙基甜菜碱、芥酸酰胺丙基甜菜碱、十二烷基二甲基甜菜碱、十四烷基二甲基甜菜碱、十六烷基二甲基甜菜碱、十八烷基二甲基甜菜碱、椰油酰胺丙基羟磺甜菜碱、月桂酰胺丙基羟磺甜菜碱、油酸酰胺丙基羟磺基甜菜碱、芥酸酰胺丙基羟磺基甜菜碱、十二烷基羟丙基磺基甜菜碱、十四烷基羟丙基磺基甜菜碱、十四烷基羟丙基磺基甜菜碱、十八羟丙基磺基甜菜碱、十二烷基羟丙基磷酸酯甜菜碱中的一种或几种的组合。