[发明专利]一种用于治疗支气管哮喘的复合壳聚糖纳米微粒及其应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种用于治疗支气管哮喘的复合壳聚糖纳米微粒及其应用；该微粒采用CS（壳聚糖）包裹DGKα基因（甘油二酯激酶α基因）表达载体和OVA（卵蛋白）形成的微粒，其能够显著降低血清中OVA特异性IgE抗体水平以及支气管炎症反应，其还能够显著降低哮喘气道反应性，降低气道敏感性，因此，在制备治疗和/或预防支气管哮喘药物和/或保健品方面具有巨大的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种用于治疗支气管哮喘的复合壳聚糖纳米微粒及其应用。

背景技术

支气管哮喘是多种炎症细胞参与，以气道嗜酸性粒细胞浸润为特征的慢性气道变态反应性炎症性疾病。人体吸入过敏原后，由气道抗原呈递细胞摄取和提呈过敏原给T细胞后，促使T细胞过度活化和增殖，始动哮喘的发生。其中CD4^＋T细胞的过度活化被认为在哮喘发病中起重要作用。CD4^＋T细胞活化后向Th2细胞分化增多，Th2细胞的过度活化导致了Th2反应为主的免疫反应，最终导致嗜酸性粒细胞等炎症细胞在气道聚集，引起气道变态反应性炎症。

T细胞无能是指T细胞对过敏原的功能性无反应性或者失活，即表现为T细胞不能增殖。诱导抗原特异性T细胞无能是诱导外周免疫耐受的主要方法，有望用于哮喘的治疗。近年研究发现，甘油二酯激酶（DGK）具有免疫调节功能。正常情况下，T细胞受体被激活可引起甘油二酯(DAG)水平迅速增高，而且共刺激信号导致DAG水平进一步增高，启动DAG信号相关通路，引起T细胞活化。若TCR被激活后DAG水平的迅速增高被抑制则会导致T细胞无能，导致免疫耐受。DGKα是DGK的一个亚型，为I型DGK，T细胞可表达DGKα。DGKα能分解DAG，从而中止或减弱DAG信号，在调节DAG信号中具有重要作用。转染DGKα基因的T细胞过度表达DGKα，抑制甘油二酯依赖的T细胞受体信号，从而抑制T细胞活化，导致T细胞不能增殖和T细胞无能。

专利CN103110959A公开了一种甘油二酯酶α基因-壳聚糖纳米粒在制备治疗过敏性哮喘药物中应用，具体公开了一种DGKα-壳聚糖纳米粒，该纳米粒能够抑制常见过敏原卵蛋白（OVA）诱发的气道炎症，降低血清过敏原OVA特异性IgE水平。但其并不能降低气道反应性，降低气道敏感性。而气道高反应性是哮喘的基本临床特征，降低气道反应性能有效减轻哮喘症状，获得临床哮喘控制，气道反应性是评估哮喘疗效的关键指标。

发明内容

为解决上述问题本发明提供一种用于治疗支气管哮喘的复合壳聚糖纳米微粒，该微粒同时包裹DGKα基因和过敏原蛋白质OVA两种不同种类的组分 ，两种物质相互作用，该微粒除了能够显著降低血清中过敏原OVA特异性IgE抗体水平以及气道炎症反应，其还能够显著降低哮喘气道反应性，降低气道敏感性。

一种用于治疗支气管哮喘的复合壳聚糖纳米微粒，该微粒是采用CS（壳聚糖）包裹DGKα基因（甘油二酯激酶α基因）表达载体和过敏原OVA形成的微粒。

优选的，所述复合壳聚糖纳米微粒中DGKα基因表达载体和OVA的质量比为2-12.24：1。

优选的，DGKα基因表达载体和CS的质量比为0.05-0.36:1。更为优选的，所述DGKα基因表达载体、OVA和CS三者的质量比为12:1:50。

上述复合壳聚糖中的各组分相互间质量比经过大量实验摸索所得出，DGKα基因表达载体是主要治疗组分，当壳聚糖与DGKα基因表达载体为0.05-0.36:1既能够保证粒径大小为200-500nm范围，进而达到有效的治疗浓度，同时使得使壳聚糖包裹DGKα基因表达载体接近其最大载药量，以提高疗效； OVA质量过大可能会影响疗效，甚至诱发哮喘气道炎症加重，可能导致治疗失败， 且OVA本身质量低，不影响壳聚糖的载药量；经过发明人反复摸索得出DGKα基因表达载体和OVA的质量比为2-12.24时，降低气道反应性较优，当OVA在此范围内含量偏低更优。

优选的，所述复合壳聚糖纳米微粒的直径为200~500nm。