[发明专利]一种血清4型禽腺病毒五邻体蛋白及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201910314515.1 | 申请日： | 2019-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN110283846A | 公开（公告）日： | 2019-09-27 |
| 发明（设计）人： | 任广彩;陈瑞爱;黄妙容;李延鹏;罗琼;张文炎;刘之文 | 申请（专利权）人： | 肇庆大华农生物药品有限公司;华农（肇庆）生物产业技术研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C07K14/075;A61K39/235;A61P31/20 |
| 代理公司： | 深圳市道臻知识产权代理有限公司 44360 | 代理人： | 陈琳;朱亚 |
| 地址： | 526000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 禽腺病毒 五邻体蛋白 血清4型 制备 制备方法和应用 重组蛋白 工业化规模 化学合成 基因合成 基因序列 表达量 免疫学 五邻体 转染 疫苗 预防 应用 生产 | ||
1.一种血清4型禽腺病毒五邻体蛋白的制备方法，包括下述步骤：
(1)、化学合成SEQ ID NO.1所示的penton基因；
(2)、制备重组pFastBac-1-penton载体；
(3)、用步骤(2)制备的重组pFastBac-1-penton载体转染sf9细胞，在sf9细胞表达得到重组蛋白；
(4)、对步骤(3)得到的重组蛋白经Ni-NTA纯化后得到纯化的血清4型禽腺病毒五邻体蛋白。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)的具体步骤为：
(ⅰ)、在目的基因penton基因的N端添加his标签，得到序列SalI位点-ATG-His标签-FAV4-penton基因-去终止密码子-终止子-HindIII位点；
(ⅱ)、将序列SalI位点-ATG-His标签-FAV4-penton基因-去终止密码子-终止子-HindIII位点克隆到pFastBac-1载体上，得到的载体pFastBac-1-penton。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)的具体步骤为：
(a)用步骤(2)制备的重组pFastBac-1-penton载体转染sf9细胞，小量表达，得到P1代病毒粒子；
(b)P1代病毒粒子转染sf9细胞，大量表达，得到血清4型禽腺病毒五邻体蛋白。
4.一种血清4型禽腺病毒五邻体蛋白，其特征在于：所述血清4型禽腺病毒五邻体蛋白由权利要求1～3中任一权利要求所述的制备方法制得。
5.权利要求4所述的血清4型禽腺病毒五邻体蛋白在制备预防禽腺病毒疫苗中的应用。
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