[发明专利]一株敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 201910309103.9 | 申请日： | 2019-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN110129245B | 公开（公告）日： | 2020-12-04 |
| 发明（设计）人： | 应汉杰;俞莹;陈勇;任培芳;刘娜;陈天鹏;孙文俊;奚迅 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/77;C12N15/90;C12N15/55;C12P13/24;C12R1/15 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 胡建华 |
| 地址： | 210000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一株敲 核酸酶 exep 谷氨酸 杆菌 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一株敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌，其特征在于，该菌株中胞外核酸酶基因ExeP失活；
所述的谷氨酸棒杆菌为谷氨酸棒杆菌ATCC13032；
所述胞外核酸酶ExeP的基因序列如SEQ ID NO.1所示；
失活后的胞外核酸酶ExeP的基因序列如SEQ ID NO.2所示。
2.权利要求1所述敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）构建ExeP基因敲除片段，所述基因敲除片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
（2）将ExeP基因敲除片段克隆到敲除质粒上，得到重组质粒；
（3）将重组质粒转化谷氨酸棒杆菌，筛选得到胞外核酸酶基因ExeP失活的基因工程菌。
3.根据权利要求2所述的敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌的构建方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的敲除质粒为pk18mobsacB。
4.根据权利要求2所述的敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌的构建方法，其特征在于，步骤（3）中，所述的谷氨酸棒杆菌为谷氨酸棒杆菌ATCC13032。
5.权利要求1所述敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌在微生物发酵中的应用。
6.权利要求1所述敲除胞外核酸酶ExeP的谷氨酸棒杆菌在制备脯氨酸中的应用。
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