[发明专利]一种大体积生物样本低温保存的方法在审
申请号: | 201910308053.2 | 申请日: | 2019-04-17 |
公开(公告)号: | CN109892321A | 公开(公告)日: | 2019-06-18 |
发明(设计)人: | 赵刚;陈中嵘;程跃;曹媛;马超;白雪飞 | 申请(专利权)人: | 中国科学技术大学 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 刘伟;赵青朵 |
地址: | 230026 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物样本 低温保存 预处理 聚四氟乙烯管 生物医学领域 添加保护剂 冷冻保存 生物功能 细胞活力 保护剂 微结构 冻存 复温 水浴 保存 安全 成功 | ||
1.一种大体积生物样本低温保存的方法,生物样本经预处理后添加保护剂然后注入聚四氟乙烯管中冷冻保存,待需要时水浴复温。
2.根据权利要求1所述的方法,在注入聚四氟乙烯管前还添加磁性纳米颗粒,且水浴复温时置于电磁线圈内进行电磁复温。
3.根据权利要求1或2所述的方法,所述预处理为样本获取、核-壳结构的干细胞水凝胶构建物或干细胞水凝胶纤维的生成。
4.根据权利要求1或2所述的方法,
所述生物样本为核-壳结构的干细胞水凝胶构建物和干细胞水凝胶纤维时,所述保护剂包括第一保护剂和第二保护剂,第一保护剂为含1mol/L乙二醇和1mol/L1,2-丙二醇的培养基溶液,第二保护剂为含1mol/L~1.5mol/L乙二醇、1.5mol/L1,2-丙二醇、0.002mol/L葡聚糖和0.75mol/L~1mol/L海藻糖的培养基溶液;
所述生物样本为脂肪干细胞时,所述保护剂包括第一保护剂、第二保护剂和第三保护剂,第一保护剂为含1mol/L乙二醇和1mol/L1,2-丙二醇的培养基溶液,第二保护剂为含1.5mol/L乙二醇+1.5mol/L1,2-丙二醇的培养基溶液,第三保护剂为含2mol/L乙二醇、2mol/L1,2-丙二醇、0.5mol/L海藻糖的培养基溶液;
所述生物样本为血管组织时,所述保护剂为含2.9mol/L二甲亚砜+2.9mol/L甲酰胺+2.7mol/L乙二醇的器官保存液。
5.根据权利要求1或2所述的方法,所述聚四氟乙烯管规格为1.2mm内径×1.6mm外径、2mm内径×2.4mm外径或3mm内径×3.4mm外径。
6.根据权利要求1或2所述的方法,所述聚四氟乙烯管均匀缠绕在支架上形成一个单元,若干个单元形成一个容器整体。
7.根据权利要求1或2所述的方法,所述冷冻为液氮冷冻;所述水浴温度为37℃。
8.根据权利要求2所述的方法,所述磁性纳米颗粒为Fe3O4纳米颗粒。
9.根据权利要求2所述的方法,按g/ml计,所述磁性纳米颗粒与所述保护剂的质量体积比为(0.05-1):100。
10.根据权利要求2所述的方法,所述电磁线圈内的电流为15A。
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