[发明专利]一种经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre及其编码基因与应用有效
| 申请号： | 201910306109.0 | 申请日： | 2019-04-17 |
| 公开（公告）号： | CN110106157B | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 潘力;董良波;王斌 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/80;C12N1/15;C12P7/06;C12P13/14;C12R1/685 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 何淑珍;江裕强 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 优化 曲霉 高效 表达 高温 海藻 ms tre 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种权利要求1所述经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre的编码基因，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种重组表达载体，其特征在于，插入了权利要求2中所述SEQ ID NO.2所述核苷酸序列。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于，包含有pMD20-T载体、黑曲霉中性淀粉酶启动子PamyA、黑曲霉tef终止子、构巢曲霉尿嘧啶生物合成的基因pyrG、黑曲霉中性淀粉酶编码基因最后1000bp序列以及所述经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre的编码基因。
5.一种转基因细胞系，其特征在于，含有权利要求3所述的重组表达载体；所述转基因细胞系为黑曲霉。
6.权利要求2所述的经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre的编码基因、权利要求3所述的重组表达载体在黑曲霉表达经优化的高温海藻糖酶MS-Tre中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
（1）构建所述经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre的重组表达载体；
（2）用步骤（1）构建的重组表达载体转化宿主细胞，所述宿主细胞为黑曲霉，得到重组菌株，即转基因细胞系；
（3）培养重组菌株，用发酵培养基诱导重组菌株表达所述经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre；
（4）回收并纯化所述经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre。
8.权利要求5所述转基因细胞系在制备权利要求1所述经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre中的应用。
9.权利要求1所述的一种经优化的能在黑曲霉中高效表达的高温海藻糖酶MS-Tre在酒精发酵与谷氨酸发酵中的应用。
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