[发明专利]用于诱导东方梨离体叶片再生不定梢的培养基、方法和及其应用

权利要求书

1.一种用于诱导栖霞大香水梨离体叶片再生不定梢的培养基，其特征是：具有MS 、 BA、TDZ 、IBA和蔗糖的继代增殖培养基和具有NN69、BA、NAA和山梨糖醇或NN69、TDZ、IBA和蔗糖或NN69、TDZ、IBA和山梨糖醇的不定梢诱导培养基，

一、 基本培养基

（1）MS培养基组成如下（表1）：

表1 MS基本培养基组成

(2) NN69培养基, 组成如下（表2）：

表2 NN69 基本培养基组成

二、 植物生长调节物质：6－苄基氨基嘌呤（BA），噻苯隆（TDZ）, 吲哚丁酸（IBA），萘乙酸（NAA），

三、碳源：蔗糖，山梨糖醇

四、 无离子水

五、琼脂粉，

还包含有试管苗建立培养基、试管苗继代增殖培养基和生根培养基，

试管苗建立培养基设置为1/2MS + 0.5-2 mg/L BA + 0.1-0.5 mg/L IBA + 30 g/L蔗糖，

继代增殖培养基设置为MS + 0.5-1.0 mg/L BA + 0.01-0.1 mg/L TDZ + 0.01-0.5mg/L IBA + 30 g/L蔗糖，

不定梢诱导培养基设置为NN69 + 3.0-7.0 mg/L BA + 0.1-0.5mg/L NAA + 10g/L-50g/L 山梨糖醇或 NN69 + 1-4 mg/L TDZ + 0.1-0.5 mg/L IBA + 20 g/L-50 g/L蔗糖或NN69 + 1-4 mg/L TDZ + 0.1-0.5 mg/LIBA + 20 g/L-50 g/L山梨糖醇，

生根培养基设置为1/4MS + 1.0-2.0 mg/L IBA + 20 g/L蔗糖。

2.一种用于诱导栖霞大香水梨离体叶片再生不定梢的培养方法，其步骤是：

把当年的枝条在具有1/2MS、BA 、IBA和蔗糖的试管苗建立培养基上得到无菌试管苗，在具有MS 、BA 、TDZ 、IBA和蔗糖的继代增殖培养基上得到试管苗健壮嫩叶，把具有割口的健壮嫩叶在有NN69、BA、NAA和山梨糖醇或NN69、TDZ、IBA和蔗糖或NN69、TDZ、IBA和山梨糖醇的不定梢诱导培养基进行诱导产生不定芽处理，

试管苗建立培养基设置为1/2MS + 0.5-2 mg/L BA + 0.1-0.5 mg/L IBA + 30 g/L蔗糖，

继代增殖培养基设置为MS + 0.5-1.0 mg/L BA + 0.01-0.1 mg/L TDZ + 0.01-0.5mg/L IBA + 30 g/L蔗糖，

不定梢诱导培养基设置为NN69 + 3.0-7.0 mg/L BA + 0.1-0.5mg/L NAA + 10g/L-50g/L 山梨糖醇或不定梢诱导培养基设置为NN69 + 1-4 mg/L TDZ + 0.1-0.5 mg/L IBA+ 20 g/L-50 g/L蔗糖或不定梢诱导培养基设置为NN69 + 1-4 mg/L TDZ + 0.1-0.5 mg/LIBA + 20 g/L-50 g/L山梨糖醇，

生根培养基设置为1/4MS + 1.0-2.0 mg/L IBA + 20 g/L蔗糖。