[发明专利]Y染色体微缺失检测的扩增组合物及试剂盒

权利要求书

1.一种Y染色体微缺失检测的扩增组合物，其特征在于，包括以下引物组合：

（1）用于扩增Y染色体AZFa区sY84位点的引物对，其碱基序列为：

sY84-F：5'- TTTCAGCAAAGAGAAGGGTCC -3'

sY84-R：5'- TCTGAAGCCTACTACCTGGAG-3'；如序列表中SEQ ID NO:1-2所示；

（2）用于扩增Y染色体AZFa区sY86位点的引物对，其碱基序列为：

sY86-F：5'- GGGAGAAGACAGCATCTACAAC -3'

sY86-R：5'- GCAGGACAGAGACTTGGTAATG -3'；如序列表中SEQ ID NO:3-4所示；

（3）用于扩增Y染色体AZFb区sY127位点的引物对，其碱基序列为：

sY127-F ：5'- CTGCAGGCAGTAATAAGGGA -3'

sY127-R ：5'- CCACTGGAATCTACCAAAGC -3'；如序列表中SEQ ID NO:5-6所示；

（4）用于扩增Y染色体AZFb区sY134位点的引物对，其碱基序列为：

sY134-F ：5'- GTCTGCCTCACCATAAAACG -3'

sY134-R ：5'- ACCACTGCCAAAACTTTCAA -3'；如序列表中SEQ ID NO:7-8所示；

（5）用于扩增Y染色体AZFc区sY254位点的引物对，其碱基序列为：

sY254-F ：5'- GGGTGTTACCAGAAGGCAAA -3'

sY254-R ：5'- GAACCGTATCTACCAAAGCAGC -3'；如序列表中SEQ ID NO:9-10所示；

（6）用于扩增Y染色体AZFc区sY255位点的引物对，其碱基序列为：

sY255-F ：5'- GTTACAGGATTCGGCGTGAT -3'

sY255-R ：5'- CTCGTCATGTGCAGCCAC -3'；如序列表中SEQ ID NO:11-12所示；

（7）用于扩增Y染色体短臂SRY位点的引物对，其碱基序列为：

SRY-F ：5'- GAATATTCCCGCTCTCCGGA -3'

SRY-R ：5'- GCTGGTGCTCCATTCTTGAG -3'；如序列表中SEQ ID NO:13-14所示；

（8）用于扩增ZFX/ZFY位点的引物对，其碱基序列为：

ZFX/ZFY-F ：5'- GGACATCCTTTGACTGTCTATC -3'

ZFX/ZFY-R ：5'- GGGTAGTCTTTCGTGTGAAC -3'；如序列表中SEQ ID NO:15-16所示；

设有2个引物组；其中，引物组A包含（1）、（3）、（6）、（7）、（8）引物对；引物组B包含（2）、（4）、（5）、（7）、（8）引物对；

2个引物组中各引物对的摩尔比为，

A组：sY84：sY127：sY255：SRY：ZFX/ZFY=（0.8-2）：（0.8-2）：（0.8-2）：（0.8-2）：（0.8-2）；

B组：sY86：sY134：sY254：SRY：ZFX/ZFY=（0.8-2）：（0.8-2）：（0.8-2）：（0.8-2）：（0.8-2）。

2.根据权利要求1所述的Y染色体微缺失检测的扩增组合物，其特征在于：还包括Y染色体微缺失检测的扩增反应体系，所述的反应体系包括任一项的引物组合物、DNA聚合酶、PCR反应缓冲液、dNTP和模板DNA。

3.根据权利要求2所述的Y染色体微缺失检测的扩增组合物，其特征在于，所述扩增反应体系为：引物浓度为50-300nM，DNA聚合酶用量0.5-2.0U，PCR反应缓冲液为2*，dNTP浓度为200-500μM，模板DNA用量10-100ng。

4.根据权利要求2或3所述的Y染色体微缺失检测的扩增组合物，其特征在于：所述的DNA聚合酶为多重PCR专用热启动DNA聚合酶。