[发明专利]一种表达Fc片段的狂犬病病毒G蛋白的融合蛋白及其制备方法

权利要求书

1.一种编码融合表达Fc片段的狂犬病病毒G蛋白的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种融合表达Fc片段的狂犬病病毒G蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

3.一种重组载体，其特征在于，携带有权利要求1所述基因的载体。

4.一种重组杆状病毒，其特征在于，含有权利要求1所述基因。

5.一种重组细胞，其特征在于，含有权利要求3所述重组载体。

6.权利要求2所述蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1. 获得权利要求1所述基因，并连接入病毒表达载体，得到重组病毒表达载体；

S2. 利用重组病毒表达载体和真核表达系统，获得感染重组病毒的表达权利要求2所述重组蛋白的重组细胞；

S3. 纯化融合蛋白。

7.根据权利要求6所述制备方法，其特征在于，步骤S2包括以下步骤：

S21. 将重组病毒表达载体转化至第一受体细胞中获得重组穿梭载体；

S22. 将重组穿梭载体转染至第二受体细胞获得重组杆状病毒；

S23. 重组杆状病毒感染第三受体细胞，获得表达权利要求2所述蛋白的重组细胞。

8.根据权利要求6所述制备方法，其特征在于，步骤S3包括以下步骤：

S31. 步骤S2获得的重组细胞，27℃培养，96小时后收获细胞；

S32. 洗涤细胞，裂解细胞，固液分离，用洗涤液A、B、C依次洗涤沉淀，溶解液溶解沉淀；

其中，洗涤液A为含50mM Tris-HCL、2Mm EDTA、100Mm NaCL、0.5%Triton X-100、2M 尿素的水溶液，

洗涤液B为含50mM Tris-HCL、2Mm EDTA、100Mm NaCL、3%Triton X-100的水溶液，

洗涤液C为含50mM Tris-HCL、2Mm EDTA、100Mm NaCL、0.5%Triton X-100、2M 盐酸胍的水溶液，

溶解液为含50mM Tris-HCL、100Mm NaCL、5mM DTT、8M 尿素的水溶液。

9.权利要求1所述基因、权利要求2所述蛋白、权利要求3所述重组载体、权利要求4所述重组杆状病毒或权利要求5所述重组细胞在制备狂犬病疫苗中的应用。