[发明专利]白术药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法在审
申请号: | 201910299616.6 | 申请日: | 2019-04-15 |
公开(公告)号: | CN109884219A | 公开(公告)日: | 2019-06-14 |
发明(设计)人: | 张文芳;林碧珊;陈锦霞;史紫娟;曾杉;陈伟钢;甘伟发;高永坚;袁春平;汤春花 | 申请(专利权)人: | 国药集团广东环球制药有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 郑彤;万志香 |
地址: | 528303 广东省佛山*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白术药材 特征图谱 白术 参照物 构建 汤剂 供试品溶液 麸炒白术 对照品 制备 超高效液相色谱仪 白术对照药材 白术饮片 对照药材 提取溶剂 物质基础 有效控制 质量监控 共有峰 绿原酸 重现性 检测 标定 滤过 饮片 | ||
1.一种白术药材UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
参照物溶液的制备:以绿原酸为对照品,加溶剂溶解,制备对照品参照物溶液;取白术对照药材,加入提取溶剂提取,滤过,取续滤液作为对照药材参照物溶液;
供试品溶液的制备:取白术药材,加入提取溶剂提取,滤过,取续滤液作为白术药材供试品溶液;取白术饮片,加入提取溶剂提取,滤过,取续滤液作为白术饮片供试品溶液;取麸炒白术饮片,加入提取溶剂提取,滤过,取续滤液作为麸炒白术饮片供试品溶液;取白术标准汤剂,加入提取溶剂提取,滤过,取续滤液作为白术标准汤剂供试品溶液;取麸炒白术标准汤剂,加入提取溶剂提取,滤过,取续滤液作为麸炒白术标准汤剂供试品溶液;
测定:将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、白术药材供试品溶液、白术饮片供试品溶液、麸炒白术饮片供试品溶液、白术标准汤剂供试品溶液和麸炒白术标准汤剂供试品溶液注入超高效液相色谱仪中测定,标定水溶性共有峰,即得所述白术药材UPLC特征图谱。
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,超高效液相色谱的色谱条件包括:
固定相:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;
流动相:流动相A为乙腈,流动相B为0.05-0.15%磷酸溶液,进行梯度洗脱;
所述梯度洗脱具体为:
0-4min,流动相A的体积分数由1%上升到6%,流动相B的体积分数由99%降低至94%;
4-10min,流动相A的体积分数由6%上升到9%,流动相B的体积分数由94%降低至91%;
10-16min,流动相A的体积分数由9%上升到18%,流动相B的体积分数由91%降低至82%;
16-22min,流动相A的体积分数由18%上升到20%,流动相B的体积分数由82%降低至80%;
22-23min,流动相A的体积分数由20%上升到90%,流动相B的体积分数由80%降低至10%。
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述超高效液相色谱的色谱条件还包括:柱温为(25±3)℃;流速为(0.25±0.1)ml/min;检测波长为(325±40)nm。
4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述提取溶剂为体积分数10%-80%的乙醇水溶液,用量为每1g白术药材加入20mL-100mL。
5.根据权利要求1-4任一项所述的构建方法,其特征在于,所述提取的方法为超声提取或加热回流提取;和/或,所述提取的时间为20-40min。
6.一种白术药材的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
参照物溶液的制备:以绿原酸为对照品,加溶剂溶解,制备对照品参照物溶液;取白术对照药材,加入提取溶剂提取,滤过,取续滤液作为对照药材参照物溶液;
待测溶液的制备:取待测样品,加入提取溶剂提取,滤过,取续滤液作为待测样品溶液;
测定:将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、和待测样品溶液注入超高效液相色谱仪中测定,即得所述待测样品的UPLC图谱。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,超高效液相色谱的色谱条件包括:
固定相:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;
流动相:流动相A为乙腈,流动相B为0.05-0.15%磷酸溶液,进行梯度洗脱;
所述梯度洗脱具体为:
0-4min,流动相A的体积分数由1%上升到6%,流动相B的体积分数由99%降低至94%;
4-10min,流动相A的体积分数由6%上升到9%,流动相B的体积分数由94%降低至91%;
10-16min,流动相A的体积分数由9%上升到18%,流动相B的体积分数由91%降低至82%;
16-22min,流动相A的体积分数由18%上升到20%,流动相B的体积分数由82%降低至80%;
22-23min,流动相A的体积分数由20%上升到90%,流动相B的体积分数由80%降低至10%。
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