[发明专利]一种筛选适宜乳杆菌增殖的氮源的方法

权利要求书

1.一种筛选适宜乳杆菌增殖的氮源的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)将不同氮源分别替换MRS培养基中的所有氮源，配制成不同氮源的培养基；

(2)将乳杆菌种子液接种到不同氮源的培养基中进行增殖培养，调节培养基的氮源为1g/L，碳源为葡萄糖6g/L，缓冲液种类为钠盐或钾盐缓冲液，缓冲液浓度为20～30g/L；

(3)计算乳杆菌利用单位质量的不同氮源的增殖量，单位质量增殖量相对越高的氮源越适宜乳杆菌增殖；所述单位质量增殖量为乳杆菌生长至稳定期的OD₆₀₀值除以培养基中氮源的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基的组成为：氮源1g/L，葡萄糖6g/L，缓冲盐20～30g/L，七水合硫酸镁0.10～0.30g/L，一水合硫酸锰0.01～0.1g/L，吐温-80 0.5～1mL/L。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基的组成具体为：葡萄糖6.0g/L，氮源1.0g/L，K₂HPO₄ 10.0g/L，Na₂HPO₄ 10.0g/L，MgSO₄·7H₂O 0.25g/L，MnSO₄·H₂O 0.05g/L，吐温-80 1mL/L。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述增殖培养具体为：以1～5％的接种量将乳杆菌种子液分别接入不同氮源的培养基进行培养，待菌浓不再升高，停止培养。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乳杆菌种子液的制备为：挑取乳杆菌单菌落，接种于MRS液体培养基中活化培养18～24h，将活化1次的乳杆菌培养液以1～5％的接种量接种至MRS液体培养基，继续活化培养18～24h，得到乳杆菌种子液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乳杆菌包括：罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、约氏乳杆菌、格氏乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、发酵乳杆菌、卷曲乳杆菌、唾液乳杆菌、清酒乳杆菌、德氏乳杆菌或瑞士乳杆菌。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述氮源包括：鱼骨蛋白胨、酵母提取物、酵母蛋白103、大豆蛋白胨、安琪蛋白胨、干酪素、酵母浸粉803、水解植物蛋白、胰蛋白胨、胰酪蛋白胨、食品级水解植物蛋白、乳清蛋白粉、大豆蛋白粉、鱼蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸膏、牛肉浸膏、骨胶原蛋白胨、食品级干酪素、牛肉蛋白胨、牛骨蛋白胨。