[发明专利]中药、调味品及外敷药物中去甲乌药碱含量的检测方法

说明书

本申请公开了中药、调味品及外敷药物中去甲乌药碱含量的检测方法，包括：步骤1，制备待测样品；步骤2，制备提取溶液和制备内标溶液；步骤3，制备样品净化剂；步骤4，利用待测样品、提取溶液、内标溶液和样品净化剂，制备待测溶液；步骤5，将待测溶液注入液相色谱‑串联质谱仪进行检测，记录色谱图，液相色谱条件为：色谱柱(3μm,3mm×100mm)；流速：0.40mL/min；柱温：30℃；进样量：5μL；流动相为：A相：乙酸铵水溶液，B相：甲醇溶液，串联质谱检测条件为：多反应监测模式，去甲乌药碱定性离子对为272.0/255.0、272.0/161.0、272.0/107.0，定量离子对为272.0/107.0。通过本申请中的技术方案，提高去甲乌药碱检测方法的简便性和批量检测能力，实现对中药、调味品及外敷药物中去甲乌药碱的高灵敏检测。

技术领域

本申请涉及药物分析的技术领域，具体而言，涉及中药、调味品及外敷药物中去甲乌药碱含量的检测方法。

背景技术

去甲乌药碱是许多天然植物中存在的药物成分，具有刺激β-肾上腺素受体、舒张血管的作用，因此在临床上可被用作强心剂。自2017年起，去甲乌药碱就被国际反兴奋剂组织WADA列为S3类(β-2激动剂类)违禁物质。去甲乌药碱主要存在于南天竹、附子、细辛、番荔枝、莲等天然植物中，这些植物正是中药材或日常饮食调味品的组成部分。因此，运动员极有可能在日常饮食中摄入去甲乌药碱而造成兴奋剂检测阳性检出。此外，由于去甲乌药碱存在于多种中药及藏药中，因此在不少外用药物中也可能含有去甲乌药碱。为了避免运动员由于日常饮食、使用外敷药物等而误服去甲乌药碱，必须建立针对日常饮食及治疗中可能涉及的中药、调味品及外敷药物的高灵敏、可靠的去甲乌药碱检测方法。

由于中药、调味品及外敷药物的基质复杂多样，且去甲乌药碱在样品中的存在含量通常较低，需要建立合适的样品前处理技术对样品中的去甲乌药碱进行提取。此外，由于大规模大批量的对中药、调味品及外敷药物中去甲乌药碱进行筛查的需要，还需要样品前处理技术具有可批处理性。而现有的去甲乌药碱检测方法，并不能够很好的满足对去甲乌药碱的检测。

发明内容

本申请的目的在于：提高去甲乌药碱检测方法的简便性、可靠性和批量检测能力，实现对中药、调味品及外敷药物中去甲乌药碱的高灵敏检测。

本申请的技术方案是：提供了中药、调味品及外敷药物中去甲乌药碱含量的检测方法，该方法包括：步骤1，制备待测样品；步骤2，制备提取溶液和制备内标溶液；步骤3，制备样品净化剂；步骤4，利用待测样品、提取溶液、内标溶液和样品净化剂，制备待测溶液；步骤5，将待测溶液注入液相色谱-串联质谱仪进行检测，记录色谱图，色谱条件为：色谱柱(3μm,3mm×100mm)；流速：0.40mL/min；柱温：30℃；进样量：5μL；流动相为：A相：乙酸铵水溶液，B相：甲醇溶液。质谱条件为：多反应监测模式，去甲乌药碱定性离子对为272.0/255.0、272.0/161.0、272.0/107.0，定量离子对为272.0/107.0。

上述任一项技术方案中，进一步地，乙酸铵水溶液为含0.1％甲酸的0.5mmol/L乙酸铵水溶液，甲醇溶液为含0.1％甲酸的甲醇溶液。

上述任一项技术方案中，进一步地，液相色谱-串联质谱仪的离子化模式为：离子源ESI+；喷雾电压(IS)：5500V；检测方式：多反应监测；去甲乌药碱定性离子对为272.0/255.0、272.0/161.0、272.0/107.0，定量离子对为272.0/107.0，为去簇电压(DP)为40V，碰撞气能量(CE)分别为20、25、30eV；内标检测离子对(m/z)为304.2/135.3。

上述任一项技术方案中，进一步地，提取溶液为含0.5％(v/v)甲酸的乙醇溶液。

上述任一项技术方案中，进一步地，乙醇溶液为不水化的乙醇溶液。