[发明专利]一种食品中绵羊源成分快速检测试剂盒及其应用有效
申请号: | 201910290267.1 | 申请日: | 2019-04-11 |
公开(公告)号: | CN110195111B | 公开(公告)日: | 2020-11-24 |
发明(设计)人: | 罗云波;许文涛;黄昆仑;张超;杜再慧;马玉婷 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6844;C12Q1/6804;C12N15/11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 食品 绵羊 成分 快速 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测食品中绵羊源成分的快速检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)待测样品提取DNA;
(2)以提取DNA为模板,采用基于内标准基因设计的特异性PCR引物组合进行PCR扩增;
(3)结果判断:采用铂钯纳米颗粒免疫层析试纸条进行结果判断,检测T线和质控C线均有蓝色条带,含有目的基因;质控C线有蓝色条带,而检测T线无条带,不含有目的基因;
所述内标准基因为SEQ ID NO.1所示的序列;
所述基因的特异性PCR引物组合,包括以下2条引物:
F: 5’- GGGTTGGAGCGGGTACAGAATA -3’; R: 5’- CACCGAAAGCGACCAGACACTA -3’;
其中上游引物F的5’端标记生物素,下游引物R的5’端标记FITC;
所述的铂钯纳米颗粒免疫层析试纸条包含测试线与质控线,测试线标记有FITC抗体,质控线标记有生物素二抗,结合垫有铂钯纳米颗粒-生物素抗体标记物。
2.权利要求1所述的特异性PCR引物组合在绵羊源成分鉴定中的应用。
3.权利要求1所述的特异性PCR引物组合在制备绵羊源成分检测试剂盒中的应用。
4.权利要求1所述的一种检测食品中绵羊源成分的快速检测方法在绵羊源成分鉴定中的应用。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述PCR扩增,其25 μL PCR扩增体系的具体配置为:10x reaction buffer,0.4 mM dNTP,0.2μM引物F,0.2μM引物R,2 U TaqPCR polymerase。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,PCR扩增反应条件为:95℃ 5min; 95℃ 30s,53℃ 30s, 72℃ 30s, 共30个循环; 72℃ 5min。
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