[发明专利]一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗及其制备方法和应用，所述基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗包括铁蛋白纳米颗粒载体蛋白、表面抗原和内腔抗原，所述表面抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的表面，内腔抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的内部空腔。本发明所述基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗结构模拟了流感病毒的天然空间构象，呈现了多种流感病毒抗原，能同时发挥多种流感病毒抗原的免疫原性，激发更全面的免疫效应，提供更广谱的抗流感病毒的免疫保护效果。同时，本发明所述铁蛋白载体在人及哺乳动物等生物机体内广泛存在，用作疫苗载体理论上具有很好的安全性，有在老人及小孩中适用的可能性。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种流感疫苗及其制备方法和应用，尤其涉及一种多抗原仿生流感疫苗及其制备方法和应用，主要涉及一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗及其制备方法和应用，具体涉及一种将衍生自流感病毒的抗原蛋白分别负载于铁蛋白纳米颗粒的外表面和装载于铁蛋白纳米颗粒中空腔室内部，模拟流感病毒天然结构的流感疫苗及其制备方法和应用。

背景技术

作为最严重的传染病之一，流感的预防却一直是困扰人类的一大难题。目前，防治流感最为有效的措施仍然是接种流感疫苗。市场上现行的多价流感疫苗，均是针对流感病毒的两种表面抗原血凝集素(hemagglutinin，HA)和神经氨酸酶(neuraminidase，NA)，具有很好的安全性及抗原性，但有效性却受到极大限制。这是由于流感病毒的HA及NA抗原极易发生抗原漂变，使得流感病毒极易发生变异，给每年流感流行毒株的预测和流感疫苗的研制带来极大困难。因此，研发和制备具有广谱抗性的对多种不同的流行毒株均具有有效抗性的通用流感疫苗则尤为迫切。利用各毒株间的保守肽或优势表位，通过强免疫原性载体的免疫增强作用，可诱导产生强的针对流感病毒的广谱中和抗体或广谱的细胞免疫反应，进而保护动物或人类免受多种流感毒株的感染，是当前通用流感疫苗研究的主要策略。

在流感病毒的众多表位中，流感病毒HA抗原免疫原性强的头部和保守的茎杆部，基质蛋白M2(matrix protein 2)胞外部分M2e和位于病毒包膜内的M1(matrix protein 1)抗原，以及核蛋白NP(nuclear protein)抗原均是目前通用流感疫苗最关注的靶点。其中，NP和M1抗原的部分氨基酸序列在A型流感病毒间高度保守，主要诱导宿主的细胞免疫特别是CTL反应。M2e抗原序列在各流感毒株间亦高度保守，主要诱导体液免疫，但其免疫原性弱，由天然感染或传统疫苗引起的抗M2e的免疫反应，几乎可以被忽略。HA是位于流感病毒脂质包膜表面的同源三聚体跨膜糖蛋白，由介导受体结合的头部和介导病毒包膜与靶细胞膜融合的茎秆区组成；HA头部蛋白含有众多优势表位，免疫原性强，能诱导针对HA受体结合区的中和抗体，但在各流感毒株间差异大；相反，HA茎杆部尤其是酶切位点及融合肽序列在各流感毒株间则高度保守。以融合表达或混合等方式制备的多抗原通用流感疫苗，因其更完善的免疫原性而表现出了更广谱的免疫保护效应，是目前通用流感疫苗研究的新思路，甚至已有多家公司的多抗原通用流感疫苗进入临床研究。